[发明专利]一种大规模纯化质粒的方法无效
| 申请号： | 96195329.2 | 申请日： | 1996-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN1190435A | 公开（公告）日： | 1998-08-12 |
| 发明（设计）人： | A·L·李;S·沙加尔 | 申请（专利权）人： | 麦克公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12P19/34 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 卢新华,温宏艳 |
| 地址： | 美国新泽西*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 公开一种从大规模微生物发酵物中大规模分离和纯化质粒DNA的方法。应用公开的方法,能单独地分离到所有3种形态的质粒DNA;超螺旋(Ⅰ型)、带切口或松弛环状(Ⅱ型)和线性(Ⅲ型)。通过公开的方法提供了适于被包含在药用组合物中的高度纯化的DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大规模 纯化 质粒 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从大规模的微生物细胞发酵物中大规模分离和纯化质粒DNA的方法，包括：a)从大规模的发酵物中收获微生物细胞；b)向收获的微生物细胞中加入足够量的裂解液；c)在流通热交换器中，加热步骤b)的微生物细胞至温度70℃～100℃，以形成粗裂解物；d)离心粗裂解物；e)过滤和透滤步骤d)的上清，产生滤液；f)步骤e)的滤液与阴离子交换基质接触；g)从阴离子交换基质中洗脱和收集质粒DNA；h)来自步骤g)的质粒DNA与反相高效液相层析基质接触；i)从步骤h)的反相高效液相层析基质中洗脱和收集质粒；j)任选地把步骤i)的产物浓缩和/或透滤到药学上可接受的载体中；以及k)任选地灭菌DNA产物。
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