[发明专利]超声波诱导植物组织基因转移方法

摘要

本发明涉及一种利用超声波诱导植物组织基因转移的方法。该方法是将植物组织块经预处理后放入盛有适合于植物组织培养且含外源DNA的缓冲液的容器中,再将超声探头置于容器壁上或直接伸入溶液中,开启超声波,在脉冲型超声波的作用下将外源基因导入植物组织块中。本发明的基因导入方法既适合于双子叶植物也适合于单子叶植物特别是禾谷类作物的基因转移,且具有设备便宜、操作方便、转化效率高等特点,因此,在植物基因工程中将有广泛的应用前景。

主权项

1.一种超声波诱导植物组织基因转移的方法，其特征在于该方法由下列各步骤组成：1)植物材料组织块的预处理：将植物组织块切成若干毫米见方的小块；2)制备缓冲液，缓冲液的pH值为6.5-8.5；3)将外源DNA加进缓冲液中，外源DNA的浓度大于10μg/ml；4)将预处理过的植物组织块放入容器中，再加入由第3)步所得含DNA的缓冲液；5)将超声波探头置于容器外壁上或伸入溶液中，开启超声波信号发生器。超声波为脉冲型，超声波作用时间为0.5～60分钟；声波频率为20K～5MHz；声强为0.1～5w/cm2；一个脉冲周期内，超声波作用时间为1～50ms，脉冲占空比为5∶0.1～5。