[发明专利]从大赖草中提取与穗形相关成分的高活性DNA的方法无效
申请号: | 97123423.X | 申请日: | 1997-12-27 |
公开(公告)号: | CN1052985C | 公开(公告)日: | 2000-05-31 |
发明(设计)人: | 赵民安;刘敏;戚家华;李维琪 | 申请(专利权)人: | 中国科学院新疆化学研究所 |
主分类号: | C07H21/04 | 分类号: | C07H21/04;C12N15/10;A01H1/00 |
代理公司: | 中国科学院新疆专利事务所 | 代理人: | 张莉 |
地址: | 830011 新疆维*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | 本发明涉及一种从大赖草核酸中高活性与穗形相关成份的确定,首先将大赖草叶片先经液氮研磨,抽提,低速离心进行两相分离,沉淀提出总DNA,再经乙醇洗涤后抽干、灭菌,经RNasp保温后,过Sepherose-28柱,分离器ONA和RNA,再进行纯化处理,经超声波及限制性内切酶酶切成DNA片段,通过花粉管通道将其转化到栽培小麦中去,该方法经过多次反复试验证明,小麦穗形均都产生了大穗形变异转化株,经过分子杂交检测,证实穗形小麦是由于大赖草基因转化后产生的结果。 | ||
搜索关键词: | 大赖草中 提取 形相 成分 活性 dna 方法 | ||
【主权项】:
1、一种从大赖草中提取与穗形相关成分的高活性DNA的方法,其特征在于,首先将大赖草叶片经液氮研磨,用三羟基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液及十二烷基磺酸钠抽提,60℃热酚—氯仿处理,低速离心进行两相分离,水相经异丙醇沉淀,提出总DNA,再经70%乙醇洗涤后抽干,溶于灭菌水中,经RNase保温处理后,过Sepherose-2B柱分离总DNA和RNA,收集总DNA。
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