[发明专利]一种谷氨酰胺发酵生产工艺

摘要

本发明公开了一种谷氨酰胺发酵生产工艺，它有效地解决了目前谷氨酰胺生产研究中摇瓶发酵结果在发酵罐规模上不能重复、菌种潜力不能充分发挥等问题。本发明采用分阶段控制ｐＨ、溶解氧，控制发酵液中糖浓度，并补入氯化钾、玉米浆等工艺发酵生产谷氨酰胺。本发明方法新颖，谷氨酰胺发酵水平提高幅度大，适用于谷氨酰胺大规模生产。$＃!

主权项

1．一种谷氨酰胺发酵生产工艺，其步骤顺序如下：(1)发酵菌株的选择：黄色短杆菌(Brevibacteriumflavum)、谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)、北京棒杆菌(Corynebacteriumpekinense)、钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum)之一；(2)母斜面制备：将上述发酵菌株接种斜面，29-37℃恒温培养8-20小时，制得母斜面，母斜面冷藏待用；(3)子斜面：将步骤(2)得到的母斜面接种子斜面，培养方法同步骤(2)；(4)一级种子培养：将步骤(3)得到的斜面菌苔接种于已灭菌的装有种子培养基的摇瓶中，在29-37℃下摇床培养8-20小时；(5)二级种子培养：将步骤(4)培养好的一级种子按2％-10％(体积比)接种于已灭菌的装有种子培养基的种子罐开始培养；培养条件：通气量0.5-1.5VVM，罐压0.01-0.05Mpa，温度29-37℃，溶解氧3％-80％饱和度；培养时间6-18小时；(6)发酵罐发酵：将步骤(5)培养好的种子按2％-10％(体积比)接种于已灭菌的装有发酵培养基的发酵罐中开始发酵，控制条件为：温度29-37℃，通气量0.5-1.5VVM，罐压0.01-0.05MPa，溶解氧0.5％-90％饱和度，pH6.5-7.5，并以消泡剂消泡；发酵8-24小时，补入发酵初始培养基0.5-1.5％(重量体积比)的氯化钾；发酵14-26小时，停止pH控制，使pH自然降低至6.2-6.6，之后控制pH在此范围内，溶解氧在20-80％饱和度之间，并连续流加30-80％(重量体积比)的糖溶液，或者将糖溶液按每次每升发酵液10-30克糖分批补入，控制发酵罐中糖浓度在5-40g/L之间；补加氯化钾之后，每间隔8-24小时补入发酵液总体积0.05％-0.3％(体积比)的玉米浆；发酵50-68小时停止补糖，待糖浓度降低至1-10g/L时发酵结束。