[发明专利]工业循环冷却水中硝酸细菌的测定方法

摘要

一种利用硝酸细菌生化反应对工业循环冷却水中硝酸细菌进行测定的方法，用适量的亚硝酸钠、碳酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、硫酸镁与蒸馏水配置成液体培养基；取冰醋酸50ml与900ml水混合，加入对氨基苯磺酸5.0克摇均，加入盐酸萘乙二胺0.05克溶解，用水稀释到1000ml制成比色试剂液；采用多管发酵技术，在28℃～30℃恒温培养3～14天；再用比色法测定试管培养基中被测试样是否为阳性反应；最后采用MPN法，对被测试样中的硝酸细菌进行定量。

主权项

1.一种工业循环冷却水中硝酸细菌的测定方法，采用最大可能菌数计数法(MPN法)，其特征在于：1)制备培养基：用适量的亚硝酸钠、碳酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、硫酸镁与蒸馏水配置成液体培养基，并用酸或碱调pH值至中性，定量分装于试管中灭菌后备用；2)制备比色试剂：取冰醋酸50ml与900ml水混合，加入对氨基苯磺酸5.0克，盖塞摇均，加入盐酸萘乙二胺0.05克溶解后，用水稀释到1000ml制成比色试剂原液，再取3～5份比色剂原液和1份水混合均匀制成比色试剂；3)水样采集与稀释：用无菌采样瓶采集被测水样，在无菌箱内以10倍稀释法做至少3个稀释度，应使最后一个稀释度接种培养后没有硝酸细菌生长；4)接种：在前述装有培养基的灭过菌的试管中分别加入等量的不同稀释度的水样，每个稀释度做4～6个重复组，其中一组作为对照组，其余为检测组；5)恒温培养：将上述检测组试管置于28～30℃恒温培养3～14天，同时将对照组试管置于4℃冰箱内保存相同的时间；6)结果检查计数：从培养后的每个稀释度的每支检测组试管及对照组试管中分别取适量的培养液于比色管中，加入适量比例的比色试剂，10～20分钟后，将检测组发出的红色与对照组目测比较，红色较淡的比色管为阳性(+)，表示有硝酸细菌生长，与对照组红色一致的为阴性(-)，表示没有硝酸细菌生长，根据检查结果，得出阳性组合指数，用MPN法查表求出每毫升水样中硝酸细菌数；所述的制备培养基是按亚硝酸钠0.5克、碳酸钠1.0克、磷酸二氢钠0.25克、磷酸氢二钾0.75、硫酸镁0.03与蒸馏水1000毫升的比例配置成液体培养基，并用盐酸[1∶1]调pH值至7.0±0.2。