[发明专利]一种抗肿瘤免疫疫苗的制取方法

权利要求书

1、一种抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，由树突状细胞与非树突状细胞融合，其特征在于先对非树突状细胞之间进行融合，再与树突状细胞融合，从而得到具有细胞表面多种类抗原的融合细胞疫苗。

2、根据权利要求1所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于树突状细胞来自哺乳动物，非树突状细胞来自哺乳动物的肿瘤细胞。

3、根据权利要求2所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于哺乳动物是人类。

4、根据权利要求1所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于非树突状细胞之间进行的融合是来自同类不同哺乳动物同种肿瘤细胞的融合或来自同类不同哺乳动物不同种肿瘤细胞的融合。

5、根据权利要求4所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于肿瘤细胞的融合是来自不同病人的同种肿瘤细胞的融合或不同病人的不同种肿瘤细胞的融合。

6、根据权利要求1所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于树突状细胞与非树突状细胞的融合是采用化学方法融合或物理学方法融合或生物学方法融合以及受体指引型细胞融合法。

7、根据权利要求6所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于化学方法融合包括以下过程：

a、培养一定量的树突状细胞，

b、取得一定量的非树突状细胞，该细胞具有多种类表面抗原，

c、树突状细胞与非树突状细胞按比例通过一种融合剂接触在一起，

d、将接触在一起的细胞培养在一种培养基中，细胞的融合需要一个培养过程，选择性培养融合细胞疫苗，融合细胞疫苗具有树突状细胞和非树突状细胞的特点。

8、根据权利要求6所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于物理学方法融合是电融合，具体过程是将树突状细胞与非树突状细胞按比例混合于5％葡萄糖溶液，将装该溶液的槽置于电脉冲仪的正负极之间，通过通电，在高压电脉冲的作用下，使得这二种细胞瞬间接触结合成融合细胞疫苗。

9、根据权利要求7或8所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于树突状细胞与非树突状细胞之间的比例是1∶1-25∶1。

10、根据权利要求5所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于肿瘤细胞的融合是采用化学方法融合或物理学方法融合或生物学方法融合以及受体指引型细胞融合法。

11、根据权利要求10所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于化学方法融合包括以下过程：

a、提取不同病人同种肿瘤细胞或提取不同病人不同种肿瘤细胞，这些细胞表面具有多种类肿瘤抗原，

b、通过一种融合剂将同种肿瘤细胞接触在一起或不同种肿瘤细胞接触在一起，

c、细胞的融合需要一个培养过程，将接触在一起的细胞培养在一种培养基中，选择培养融合细胞。

12、根据权利要求7或11所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于融合剂是聚乙二醇。

13、根据权利要求7或11所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于培养基是RPMI-1640培养基或DMEM培养基。

14、根据权利要求10所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于物理学方法融合是电融合，具体过程是将不同病人的同种肿瘤细胞或不同种肿瘤细胞置于5％葡萄糖溶液，将装该溶液的槽置于电脉冲仪的正负极之间，通过通电，在高压电脉冲的作用下，使得肿瘤细胞瞬间接触和结合。

15、根据权利要求2或3所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于树突状细胞和肿瘤细胞来自同体或异体。

16、根据权利要求3所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于树突状细胞和非树突状细胞来自人类个体细胞。

17、根据权利要求1所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于融合细胞表面抗原是多种类肿瘤抗原。

18、根据权利要求1或7或8所述的抗肿瘤免疫疫苗的制取方法，其特征在于融合疫苗具有(a)主要组织相容性复合体Ⅰ和Ⅱ，(b)共同刺激抗原，(c)细胞表面多种类肿瘤抗原。