[发明专利]生产L-赖氨酸的棒状菌和制备L-赖氨酸的方法有效
申请号: | 00109840.3 | 申请日: | 2000-07-07 |
公开(公告)号: | CN1280184A | 公开(公告)日: | 2001-01-17 |
发明(设计)人: | 贝蒂娜·默克尔;瓦尔特·普费弗勒;卡罗琳·克罗伊策;斯特凡·汉斯;梅希特希尔德·里平;洛塔尔·埃格林;赫尔曼·扎姆;米罗斯拉夫·帕特克 | 申请(专利权)人: | 德古萨-于尔斯股份公司;于利希研究中心有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/08;C12P19/34 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林晓红 |
地址: | 联邦德国美因*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生产 赖氨酸 棒状菌 制备 方法 | ||
1.生产L-赖氨酸的棒状菌,其具有扩增的lysE基因,在这些菌株中,选自包括dapA基因,lysC基因,pyc基因和dapB基因的组的附加基因分别或一起得到扩增,尤其是超量表达。
2.如权利要求1中所要求的棒状菌,其中dapB基因得到扩增,尤其是超量表达。
3.如权利要求1中所要求的棒状菌,其中额外含有SEQ ID NO.1所示的dapB基因翻译起点上游的5′末端的dapB基因是扩增的,尤其是超量表达的。
4.如权利要求1中所要求的棒状菌,其含有SEQ ID No.5和SEQID No.6中所示的dapA启动子的MC20或MA16突变。
5.优选地为重组的DNA,其来源于棒状菌,并且能够在棒状菌中复制,该DNA至少含有SEQ ID No.1中所示的额外编码dapB基因翻译区上游的5’末端的核苷酸序列。
6.如权利要求5中所要求的能够复制的DNA,其具有SEQ ID No.1中所示的核苷酸序列。
7.如权利要求1中所要求的棒状菌,其中dapA基因和1ysC基因是扩增的,尤其是超量表达的。
8.一种通过发酵具有扩增的lysE基因的棒状菌制备L-赖氨酸的方法,其中使用这样的细菌,其编码选自包括dapA,lysC,pyc和dapB的组的基因的核苷酸序列分别或一起得到扩增,尤其是超量表达。
9.如权利要求8的方法,其中使用这样的细菌,其dapA基因和lysC同时得到扩增,尤其是超量表达。
10.如权利要求8的方法,其中使用这样的细菌,其dapA基因和dapB基因同时得到扩增,尤其是超量表达。
11.如权利要求8的方法,其中使用由一种或多种质粒载体转化的菌株,所说的质粒载体携带有待扩增的基因的核苷酸序列。
12.如权利要求9的方法,其中使用由一种质粒载体转化的菌株,所说的质粒载体携带有编码选自包括dapA,lysC和lysE基因的核苷酸序列。
13.如权利要求11的方法,其中使用由一种或多种质粒载体转化的菌株,所说的质粒载体分别或一起携带编码dapA,lysC,pyc和lysE基因的核苷酸序列。
14.如前述一或多项权利要求所要求的方法,其中使用谷氨酸棒杆菌的细菌。
15.如前述一或多项权利要求所要求的通过发酵制备L-赖氨酸的方法,该方法包括以下步骤:
a)发酵L-赖氨酸生产菌,在这些细菌中,所描述的基因得到了扩增,
b)在培养基中或在细菌细胞中富集L-赖氨酸,和
c)分离L-赖氨酸。
16.大肠杆菌K-12菌株DH5α/pEC7lysE,保藏号为DSM12871。
17.大肠杆菌K-12菌株DH5α/pEC7dapBlysE,保藏号为DSM12875。
18.谷氨酸棒杆菌菌株DSM5715/pJC23,保藏号为DSM12869。
19.谷氨酸棒杆菌菌株DSM5715aecD::dapA(MA16),保藏号为DSM12867。
20.谷氨酸棒杆菌菌株DSM5715aecD::dapA(MC20),保藏号为DSM12868。
21.谷氨酸棒杆菌DM678菌株,保藏号为DSM12866。
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