[发明专利]一种手性－反－第一菊酸的酶拆分制造方法

权利要求书

1、一种手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，以消旋的(±)-第一菊酸酯为原料，以酯酶为催化剂，催化(±)-第一菊酸酯不对称水解反应；其特征在于：

(1)(±)-第一菊酸酯中顺式与反式异构体比例在10～90/90～10范围之间，在反应溶液中(±)-第一菊酸酯浓度在0.1～40％范围中；

(2)酯酶由新鲜猪肝或其他哺乳动物如马.狗.兔等肝脏或某些细菌或酵母菌提取，活力不低于0.1u/mg，酯酶的用量为底物第一菊酸酯的0.1～10％；

(3)加入特定的添加物改变酶反应的微环境，特定添加物选自寡糖、多糖、非离子型表面活性剂之一种或多种，每种添加物在反应体系中的浓度在0.001～0.2％范围内。

(4)反应介质为无机盐缓冲溶液、有机盐缓冲溶液、蒸馏水、脱离子水之一种；

(5)水解反应在搅拌或振荡下进行，水解反应温度在20～70℃范围内，水解反应时间6～96小时，控制反应溶液pH在3～11范围内。

2、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：所述寡糖、多糖为蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉子糖、葡聚糖、琼脂糖、糊精；所述非离子型表面活性剂为蓖麻油聚氧乙烯、脂肪醇聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、失水山梨糖脂肪酸酯、聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯。

3、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：所述无机盐缓冲溶液为磷酸盐、碳酸盐、硼酸盐缓冲溶液；有机盐缓冲溶液为甘氨酸-氢氧化钠、巴比妥钠-盐酸、Tris-盐酸等缓冲溶液。

4、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：所述酯酶经吸附或共价结合的方法固定化后重复使用。

5、按照权利要求1或2所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：添加物的浓度范围为0.01～0.1％。

6、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：消旋第一菊酸酯的浓度范围为1～10％。

7、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：猪肝酯酶的用量为底物第一菊酸酯的0.5～5％。

8、按照权利要求1所述手性R(+)-反-第一菊酸的酶拆分制造方法，其特征在于：水解反应温度在30～50℃，水解反应过程中反应介质的pH在6～8。