[发明专利]外源基因定点整合的双重荧光筛选方法无效
| 申请号： | 00116072.9 | 申请日： | 2000-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN1348012A | 公开（公告）日： | 2002-05-08 |
| 发明（设计）人： | 汪亚平;胡炜;陈尚萍;朱作言 | 申请（专利权）人： | 中国科学院水生生物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉科宏专利事务所 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 43007*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基因 定点 整合 双重 荧光 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1、一种外源基因定点整合的双重荧光筛选方法，其特征在于：该方法以受体基因组中靶位DNA顺序为定点整合载体的同源DNA片段；以绿色荧光蛋白(GFP)基因为正向选择基因，置于同源DNA片段内；以蓝色荧光蛋白(BFP)基因为负向选择基因，置于同源DNA片段外侧。
2、根据权利要求1所述的外源基因定点整合的双重荧光筛选方法，其特征在于靶位DNA片段克隆自鲤鱼和海鲤β-肌动蛋白基因编码顺序及其3′侧翼顺序，β-肌动蛋白基因顺序至翻译终止码共1kb为同源短臂(2)，3′侧翼顺序6kb为同源长臂(3)，正向检测引物(7)设在基因组非靶位DNA顺序(8)上，反向检测引物(9)设在载体上。
3、根据权利要求2所述的外源基因定点整合的双重荧光筛选方法，其特征在于正向检测引物(7)设在同源短臂(3)5′外侧基因组非靶位DNA顺序(8)上，反向检测引物(9)设在载体的选择基因GFP基因(4)上。
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