[发明专利]生产食用、药用真菌菌粉和真菌多糖的方法

说明书

本发明属于酒精废糟液综合利用领域。主要是以生产酒精的废糟液为原料，经深层液体发酵的方法来培养生产各种食用和药用真菌菌粉及真菌多糖。

酒精废糟液(Vinasse)是发酵法生产酒精的副产品，是一种高浓度有机废水，我国每年的排放量达1500万吨以上，这不仅是资源的极大浪费，同时也严重污染了环境。酒精废糟液富含可供多种食用、药用真菌生长、代谢所需要的营养物质，如氮源、碳源、无机盐及维生素等。以其为培养基，发酵培养香菇、平菇、木耳、银耳、猴头菇等食用真菌和灵芝、云芝、冬虫夏草等药用真菌，可将菌丝体制备成菌粉，也可从菌丝体和发酵液中提取真菌多糖。

本发明的目的就是为了更好地利用酒精废糟液(主要是玉米酒精废糟液)而提供一种酒精废糟液生产食、药用真菌菌粉和真菌多糖的方法。

本发明的目的可以通过以下措施来达到：

一、本发明使用的菌种和菌种扩培的方法

(1)本发明使用的菌种：灵芝、云芝、黑木耳、香菇、双孢菇、平菇、猴头菇、金针菇等食用、药用真菌菌种均来源于山东省金乡县食用菌研究所和辽宁省朝阳市食用菌研究所。

(2)菌种扩大培养的方法：

A、斜面菌种的制备与处理：斜面菌种培养基采用PDA综合培养基(马铃薯200克、白糖20克、琼脂20克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁1.5克、水1000毫升)，接种后于25-30℃下培养10-15天。食、药用真菌菌种在斜面培养基上附着能力很强，如果铲下后直接置于培养基中，上摇床培养，则易形成大菌块，甚至只有一个大菌块，不利于进一步培养。所以在接入一级斜面菌种前要对一级斜面菌种进行破碎(使用接种针进行手工破碎)，破碎处理后，菌种接入新的液体培养基后能漂浮于液体表面，菌种分散性好、发菌点多，使菌种量及菌球密度增加。

B、一级液体种子(摇瓶种子)的制备：

采用的培养基是：玉米酒精废糟液滤液，其PH值为5.5-6.5。其制备方法是在容积是250毫升的三角瓶内，装量70-90毫升的培养基，灭菌后冷却至30℃时接入斜面菌种，接种量为8-12％，先于28℃条件下静置24小时后置于摇床上160-180rpm，28℃振荡培养48-72小时。

二、本发明使用的发酵培养基及生产食、药用真菌菌丝体和菌粉的方法

(1)发酵培养基及发酵条件

Ⅰ、采用玉米酒精废糟液滤液，其PH值为6.0。

Ⅱ、常规灭菌后，按10％的接种量接种至种子扩培罐(种子扩培罐除培养时间为2-3天与发酵罐4-5天不同外，其余均与发酵罐培养条件相同)；采用通风搅拌发酵罐0-12小时，搅拌速度为80-100rpm，通气为0.5∶1vvm；12-72小时搅拌速度为120-140rpm，通气为0.5∶1vvm；72-144小时搅拌速度为160-200rpm，通气为0.5∶1vvm。气升式反应器通风搅拌的条件为0-12小时0.25∶1vvm；12-72小时0.5∶1vvm；72-144小时0.75∶1vvm。两者的培养温度均为25-28℃。

(2)食用、药用真菌菌粉制备

发酵终结后，将发酵液通过板框过滤器，收集滤并，然后通过干燥机60-80℃干燥，并粉碎或制成颗粒，即为菌粉。本发明的菌粉收率可达1.03-1.15％。

三、本发明提取真菌多糖的方法

(1)从发酵液中提取食、药用真菌多糖的方法：

Ⅰ、发酵液浓缩的方法：本发明采用薄膜浓缩的方法对发酵液进行浓缩；超滤膜选择MWCO10000的聚砜不对称膜(PS-1)，操作压力0.2MPa，料液温度为20-30℃，循环速度0.22m/s左右，在此条件下超滤200min，通量和截留率分别稳定在9.11/m²·h和96％左右，多糖收率为92.6％。