[发明专利]耐储藏水稻的筛选方法

权利要求书

1、一种耐储藏水稻的筛选方法，其步骤如下：

1)计量待测水稻和LOX-3缺失体材料(作为对照)的种子，切下种子单胚；

2)取单胚分别放入试管中；

3)在各试管中吸取0.5-1.5ml溶液A(含0.01-0.2％(V/V) Tween-20、0.5-5mmol/L亚油酸或亚麻酸、0.2-0.4mol/L pH8.2-9.0的硼酸缓冲液的溶液)，室温下放置5-30min后，再分别加入50-400μl溶液B(含5-25％(V/V)醋酸、5-25％(V/V)饱和碘化钾的溶液)和50-400μl溶液C(0.5-5％(W/V)淀粉)；

4)4-50hr后观察待测水稻种胚和已知LOX-3缺失体材料种胚的反应显色差别，含有正常LOX-3活性的单粒种胚的试管均呈略带紫的橙红色或紫红色，LOX-3缺失的单粒种胚和已知LOX-3缺失体的颜色则呈淡乳白色略偏黄。

2、一种耐储藏水稻的筛选方法，其步骤如下：

1)计量待测水稻和LOX-3缺失体材料(作为对照)的种子，切下种子单胚；

2)取单胚分别放入试管中；

3)在各试管中吸取0.5-1.5ml溶液A(含0.01-0.2％(V/V) Tween-20、0.5-5mmol/L亚油酸或亚麻酸、0.2-0.4mol/L pH8.2-9.0的硼酸缓冲液的溶液)，室温下放置5-30min后，再分别加入50-400μl溶液B(含5-25％(V/V)醋酸、5-25％(V/V)饱和碘化钾的溶液)和50-400μl溶液C(0.5-5％(W/V)淀粉)：

4)4-50hr后以蒸馏水作为对照，比色测定410nm吸光值(A₄₁₀，下同)，计算待测水稻与LOX-3缺失体材料Daw Dam种胚的A₄₁₀差异是否达到显著或极显著水平：判断待测水稻种胚LOX-3的缺失情况：样本与对照两者A₄₁₀差异呈显著或极显著水平，表明样本不是LOX-3缺失体；反之，则是缺失体。

3、权利要求1或2所述的耐储藏水稻的筛选方法，其特征在于：在4-50hr后观察待测水稻种胚和已知LOX-3缺失体材料种胚的反应显色差别的同时，以蒸馏水作为对照，比色测定A₄₁₀，计算待测水稻与LOX-3缺失体材料种胚A₄₁₀差异是否达到显著或极显著水平。根据色差与显著水平结果，判断待测水稻种胚LOX-3的缺失情况：含有正常LOX-3活性的单粒种胚的试管均呈略带紫的橙红色或紫红色，LOX-3缺失的单粒种胚的试管则呈淡乳白色略偏黄；样本与对照两者A₄₁₀差异呈极显著或显著水平，表明样本不是LOX-3缺失体；反之，则是缺失体。