[发明专利]编码poxB基因的新核苷酸序列

权利要求书

1、分离的多核苷酸，其含有选自如下一组的多核苷酸序列：

a)与编码含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的多肽的多核苷酸至少70％相同的多核苷酸，

b)编码含有与SEQ ID NO:2的氨基酸序列至少70％相同的氨基酸序列的多肽的多核苷酸，

c)与a)或b)的多核苷酸互补的多核苷酸，以及

d)含有a),b)或c)的多核苷酸序列的至少15个连续碱基的多核苷酸。

2、权利要求1的多核苷酸，其中多核苷酸是能复制的优选重组的DNA。

3、权利要求1的多核苷酸，其中多核苷酸是RNA。

4、权利要求2的多核苷酸，含有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

5、权利要求2的多核苷酸序列，其编码含有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的多肽。

6、权利要求2的能复制的DNA，含有

(ⅰ)如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，或

(ⅱ)在遗传密码简并区内相应于的(ⅰ)序列的至少一个序列，或

(ⅲ)与互补于(ⅰ)或(ⅱ)序列的序列杂交的至少一个序列，和任选地

(ⅳ)(ⅰ)中有功能的中性有义突变。

7、含有权利要求1特别是其中d)的多核苷酸的载体，保藏于大肠杆菌DSM 13114中。

8、作为宿主细胞的含有poxB基因的缺失或插入的棒状细菌。

9、生产L-氨基酸特别是L-赖氨酸的方法，其特征在于进行以下步骤：

(a)发酵生产所需氨基酸的细菌，该细菌中至少poxB基因是弱化的，

(b)富集培养基或细菌细胞中的所需L-氨基酸，及

(c)分离L-氨基酸。

10、权利要求9的方法，其特征在于使用如下细菌，该细菌中所需L-氨基酸生物合成途径的其它基因额外被扩增。

11、权利要求9的方法，其特征在于使用如下细菌，该细菌中降低所需L-氨基酸生成的代谢途径至少被部分抑制。

12、权利要求9的方法，其特征在于权利要求1特别是1a至1c的多核苷酸的表达被降低。

13、权利要求9的方法，其特征在于权利要求1特别是1a至1c的多核苷酸编码的多肽(酶蛋白)的催化活性被降低。

14、权利要求9的方法，其特征在于使用如下细菌，该细菌中弱化是通过用质粒pCR2.1poxBint或其组成部分进行整合诱变而实现，所述质粒示于图1并以保藏号DSM13114保藏。

15、权利要求9的方法，其特征在于发酵如下细菌生产L-赖氨酸，该细菌中选自如下一组的一或多个基因同时过表达：

·编码编码二氢-2,6-吡啶二羧酸合酶的dapA基因，

·赋予S-(2-氨基乙基)半胱氨酸抗性的DNA片段，

·编码丙酮酸羧化酶的pyc基因，

·编码琥珀酰二氨基庚二酸脱琥珀酰化酶的dapE基因，

·编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶的gap基因，

·编码苹果酸：：醌氧化还原酶的mqo基因，

·编码赖氨酸输出蛋白的lysE基因。

16、前述任一项权利要求的方法，其特征在于使用谷氨酸棒杆菌的微生物。