[发明专利]新蛋白质,其编码基因及它们的使用方法

权利要求书

1.抗微生物蛋白，可通过硫酸铵沉淀法沉淀Lyophyllum shimeji获得含水提取物级分来获得该蛋白质，其中所述蛋白质具有至少抗茄属丝核菌或Pyricularia oryzae的抗微生物活性，并在SDS-PAGE法中，显示出分子量约为70kDa和/或约为65kDa的组分的存在。

2.根据权利要求1的抗微生物蛋白，其中N-末端具有序列表中SEQ IDNO：3的N-末端氨基酸序列：Asn Ala Glu Glu Gly Thr Ala Val Pro Tyr Val ProGly Tyr His Lys Lys Asn Glu Ile Glu Phe Gln Lys Asp Ile Asp Arg Phe Val。

3.抗微生物蛋白，其具有序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列，对SEQID NO：2进行一个或多个氨基酸突变所得的氨基酸序列，或与所述序列具有50％或更高同源性，并且显示出抗茄属丝核菌或Pyricularia oryzae的抗微生物活性的氨基酸序列。

4.根据权利要求3的抗微生物蛋白，其具有的氨基酸序列与序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有60％或更高的同源性。

5.根据权利要求3的抗微生物蛋白，其具有的氨基酸序列与序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有70％或更高的同源性。

6.根据权利要求3的抗微生物蛋白，其具有的氨基酸序列与序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有80％或更高的同源性。

7.根据权利要求3的抗微生物蛋白，其具有的氨基酸序列与序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有90％或更高的同源性。

8.根据权利要求3的抗微生物蛋白，其具有的氨基酸序列与序列表中SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有95％或更高的同源性。

9.抗微生物蛋白，其含有选自下列的单个多肽：具有序列表中SEQ IDNO：2的氨基酸序列中的氨基酸残基76至618的部分氨基酸序列的多肽；具有对SEQ ID NO：2进行一个或多个氨基酸突变所得的氨基酸序列的多肽；或具有与SEQ ID NO：2有50％或更高同源性的氨基酸序列，并且显示出抗茄属丝核菌或Pyricularia oryzae的抗微生物活性的多肽；或这些多肽的组合。

10.产生根据权利要求1，3或9的抗微生物蛋白的方法，所述方法包括下列步骤：

回收通过硫酸铵沉淀法，用75％-饱和硫酸铵沉淀的Lyophyllum shimeji含水提取物级分；和

对所述级分进行离子交换层析并回收用0.05M至1M的NaCl洗脱的级分。

11.编码根据权利要求1，3或9的抗微生物蛋白的基因。

12.根据权利要求11的基因，其具有序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列，通过在此碱基序列中取代，缺失，插入和/或添加一个或多个碱基而得到的碱基序列，或能在严谨条件下与上述碱基序列杂交的碱基序列。

13.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有50％或更高的同源性。

14.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有60％或更高的同源性。

15.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有70％或更高的同源性。

16.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有80％或更高的同源性。

17.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有90％或更高的同源性。

18.根据权利要求11的基因，它与序列表中SEQ ID NO：1的碱基序列具有95％或更高的同源性。