[发明专利]包含功能性以及非功能性剪接供体位点和剪接受体位点的反转录病毒载体

权利要求书

1.一种反转录病毒载体，它包含一个功能性剪接供体位点(FSDS)和一个功能性剪接受体位点(FSAS)；其中所述FSDS和所述FSAS邻接一个第一目的核苷酸序列(NOI)；其中所述FSDS位于所述FSAS上游；其中所述反转录病毒载体衍生自反转录病毒原载体；其中所述反转录病毒原载体包含一个能够产生所述功能性剪接供体位点(FSDS)的第一核苷酸序列(NS)；一个能够产生所述功能性剪接受体位点(FSAS)的第二NS；一个能够产生一个非功能性剪接供体位点(NESDS)的第三NS；一个能够产生一个非功能性剪接位点(NFSS)的第四NS；其中所述第一NS位于所述第二NS下游而且其中所述第三NS和第四NS位于所述第二NS的上游；使得所述反转录病毒原载体在需要靶位点反转录后所述反转录病毒载体能够被剪接。

2.根据权利要求1的反转录病毒载体，其中所述NFSS为NFSDS。

3.根据权利要求1的反转录病毒载体，其中所述NFSS为非功能性剪接受体位点(NFSAS)。

4.根据权利要求1或权利要求2或权利要求3的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒载体还包含一个第二NOI；其中所述第二NOI位于所述FSAS的下游。

5.根据权利要求4的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒原载体包含所述第二NOI；其中所述第二NOI位于所述第二NS下游。

6.根据权利要求4或权利要求5的反转录病毒载体，其中所述第二NOI或其表达产物为治疗剂或诊断剂或者包含治疗剂或诊断剂。

7.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第一NOI或其表达产物是或者包含任何一种或多种赋予选择性的因子(例如标记元件)、病毒必需元件或其部分或它们的组合。

8.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第一NS位于反转录病毒原载体3’端或其附近；最好是其中所述3’端包含一个U3区和一个R区；并且最好其中所述第一NS位于所述U3区和所述R区之间。

9.根据权利要求8的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒原载体的所述U3区和/或所述第一NS包含为第三NOI的NS；其中所述NOI为转录控制元件、编码序列或其部分的任何一种或多种。

10.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第一NS可得自病毒。

11.根据权利要求10的反转录病毒载体，其中所述第一NS为一种内含子或其部分。

12.根据权利要求11的反转录病毒载体，其中所述内含子可得自SV40病毒的小t-内含子。

13.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒原载体包含一个反转录病毒包装信号；并且其中所述第二NS位于所述反转录病毒包装信号下游，使得可防止于第一靶位点进行剪接。

14.根据权利要求13的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒包装信号包含为NFSDS的第四NS。

15.根据权利要求14的反转录病毒载体，其中所述反转录病毒包装信号包含为NFSAS的第四NS。

16.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第二NS位于所述第一NOI下游，使得所述第一NOI能够于第一靶位点表达。

17.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第二NS置于所述第一NOI的下游，使得所述第一NOI能够在第一靶位点表达而且提高所述反转录病毒载体滴度。

18.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第二NS置于一个多克隆位点的上游，使得可插入一个或多个额外NOI。

19.根据任一前述权利要求的反转录病毒载体，其中所述第二NS为编码免疫分子或其部分的核苷酸序列。

20.根据权利要求19的反转录病毒载体，其中所述免疫分子为免疫球蛋白。

21.根据权利要求20的反转录病毒载体，其中所述第二NS为编码免疫球蛋白重链可变区的核苷酸序列。