[发明专利]HER－2/neu融合蛋白

说明书

相关申请

本发明要求1999年1月29日美国临时申请60/117,976的优先权，并参考了该申请的全部内容。

基于联邦政府资助的权利申明

无。

发明领域

本发明主要涉及HER-2/neu融合蛋白，编码该蛋白质的核酸分子，表达该蛋白质的病毒载体，和包含该蛋白质和/或编码该蛋白质的核酸分子的药物组合物(例如疫苗)。本发明还涉及通过激发或增强对HER-2/neu蛋白质免疫应答来治疗或预防癌症的方法，包括用于治疗与HER-2/neu致癌基因相关的癌症。

发明背景

尽管投入了大量人力物力，癌症仍然是主要死因之一。例如，癌症是35-74岁妇女中的头号死因。乳房癌是妇女中最常见的癌症，而且其发病率正在上升。据估计，9名妇女中就有1名可能被诊断为乳房癌。乳房癌的标准治疗方法主要围绕手术、放射和化疗相结合。这些疗法对某些癌症具有显著疗效。然而，如果诊断滞后，乳房癌将是最难治愈的。所以需要可早期诊断和治疗的方法。

癌症的共同特征之一是细胞不受控制的生长。癌细胞似乎发生了转变，由其正常表型转变为可自主生长的恶性表型。体细胞基因的扩增和过度表达被认为是引起细胞恶变共同的最初行为。由致癌基因编码的恶性表型特征通过细胞分裂传递给恶变细胞的后代。

至今，已鉴定了至少40个在癌细胞中活动，并引起或参与恶变的致癌基因。已根据这些基因产物(例如致癌基因表达的蛋白质)的推定功能或位置对这些致癌基因进行了分类。

据信，在某些方面，致癌基因正常细胞生理学所必需的。例如，HER-2/neu致癌基因似乎是受体样糖蛋白类酪氨酸激酶家族的一员，与表皮生长因子受体(EGFR)具有高度的相同性。据推测，HER-2/neu在细胞生长和/或分化中起着一定作用。似乎，HER-2/neu通过一种正常基因产物的增加或下调所致的定量机制诱导了恶变。

p185糖蛋白是HER-2/neu致癌基因的产物。在乳房癌、卵巢癌、结肠癌、肺癌和前列腺癌等多种癌症中，HER-2/neu基因发生扩增，p185过度表达。p185与恶变相关，被发现存在于卵巢、前列腺、结肠和肺等部位发生的50-60％导管原位癌，20-40％侵袭性乳房癌和腺癌实质性组分中。HER-2/neu表达不仅与恶性表型密切相关，而且与恶变发展相关。HER-2/neu的过度表达与乳房癌和卵巢癌的预后不良相关。

p185是一种跨膜蛋白质，估计其分子量约185KD，长约1255个氨基酸。p185有一个645氨基酸的胞外域(ECD)，其氨基酸序列与EGFR具有至少40％相同性，一个高度疏水的跨膜域，和一个约580氨基酸的羧基末端胞内域(ICD)，与EGFR具有至少80％相同性。

目前需要一种针对HER-2/neu相关恶变的抗癌疫苗，以及可激发或增强对HER-2/neu基因免疫应答的组合物和方法。本发明就针对了这些及其它重要目的。

发明概述

本发明提供了HER-2/neu p185融合蛋白，编码该蛋白的核酸分子，包含该编码聚核苷酸的病毒载体，用于免疫温血动物从而抵抗HER-2/neu相关性恶变。可将本发明的融合蛋白或核酸分子制成组合物，还包含药学上认可的的载体或稀释剂，例如水包油乳液，还可含有一种或多种其它活性成分，例如免疫刺激物，例如SBAS-2，3D-MPL，QS21或3D-MPL联合QS21。本发明的组合物可以是疫苗的形式，或以此形式使用。可将所述的融合蛋白、核酸分子、病毒载体、药物组合物和/或疫苗一次性给予(例如，给予具有癌症发生和复发高度危险性的个体，或怀疑患有癌症的人)，或定期给予(例如，给予具有癌症发生和复发高度危险性的个体，或怀疑患有癌症的人)。本发明的化合物或组合物可用于包括人在内的温血动物，用于治疗一种或多种已经存在的肿瘤，或预防肿瘤的发生或复发。

本发明还提供了一种通过激发或增强对HER-2/neu蛋白质免疫应答从而抑制或预防患者体内癌症发展的方法，包括给予患者以上所述的药物组合物或疫苗。所述患者可以是，例如，乳房癌、卵巢癌、结肠癌、肺癌或前列腺癌患者，本发明方法可用于治疗这些患者，或者预防性治疗具有以上癌症危发性的患者。实施方式之一中，所述的给予药物组合物或疫苗包括：用本发明核酸分子体外转染温血动物的细胞，或用含本发明核酸分子的病毒载体体外感染温血动物的细胞，然后将转染或感染后的细胞回输给患者。