[发明专利]预防腹泻病原菌的乳杆菌菌株

说明书

本发明涉及乳杆菌属的新微生物，它们可用于预防病原菌引起的腹泻。具体而言，本发明涉及使用该微生物制备可摄食的支持物和含有该支持物的组合物。

产生乳酸作为主要代谢成分的生物早已为人所知。这些细菌分别可见于牛奶和牛奶加工厂、活的或腐烂的植物，也存在于人和动物的肠道中。这些微生物统称为“乳酸细菌”，它们代表了非同质性的组群，包括例如乳球菌属、乳杆菌属、链球菌属、双歧杆菌属，片球菌属等。

乳酸细菌已被用作保存食物的发酵剂，这利用了其低pH和在发酵活动中产生的发酵产物的作用来抑制腐败细菌的生长。为此，乳酸细菌已被用来制备多种不同的食品，如乳酪、酸奶和其他牛奶发酵制品。

最近，乳酸细菌引起广泛关注是因为发现某些菌株在摄入后对人和动物具有有利作用。具体而言，已经发现乳杆菌属或双歧杆菌属的特定菌株能够在肠粘膜上定居，帮助维持人和动物的健康。

在这方面，EP 0 768 375公开了双歧杆菌属的特定菌株，它们可以植入肠道菌群，也可以附着肠细胞。据报道，这些双歧杆菌帮助免疫调节，能够竞争性排斥病原菌对肠道细胞的附着，从而有助于维持个体健康。

最近几年，研究集中在乳酸细菌作为益生剂(probiotic agent)的潜在用途。益生菌是活的微生物制品，它通过保存肠道内的天然菌群促进个体健康。只要微生物制品的有效微生物和其作用方式是已知的，该微生物制品通常被认为是益生菌。人们认为，益生菌附着在肠道粘膜上，定居在肠道内，同样防止有害微生物附着于肠粘膜上。其作用的一个重要前提是它们必须以合适和活的形式到达肠道粘膜，而不会在胃肠道前部被破坏，特别是在胃中低pH的影响下。

在这方面，WO 97/00078公开了一种称为乳杆菌GG(ATCC 53103)的特异菌株，它是益生菌。该微生物特别是用在防止或治疗食物引起的过敏反应的方法中，它与已经用胃蛋白酶和/或胰蛋白酶水解处理过的食物一起给予服用者。选用的乳杆菌菌株据称具有附着和定居特性，具有蛋白酶系统，因此，食物中含有的蛋白质被该特异性乳杆菌菌株分泌的蛋白酶进一步降解。该文献中讨论的方法最终导致蛋白质原料被肠道吸收，不再有明显的过敏物质。

并且，EP 0 577 903提及使用具有取代幽门螺杆菌能力的乳酸菌制备用于治疗或预防由幽门螺杆菌引起的溃疡的支持物，幽门螺杆菌被认为是导致溃疡的病因。

了解到乳酸菌的某些菌株可能提供的有利特性，本领域希望获得其他对人和/或动物的健康有益的乳酸菌。

因此，本发明意欲提供对人和/或动物具有新的有益特性的细菌菌株。

通过提供新的微生物，即属于乳杆菌属具有防止腹泻病原菌定居于肠道能力的乳酸细菌，实现了本发明的目的。

根据优选实施方案，乳杆菌菌株可以附着在哺乳动物肠粘膜上，可以在0.4％的胆汁盐存在时生长。

然而，根据另一个优选实施方案，乳酸菌选自鼠李糖乳杆菌或类干酪乳杆菌，优选类干酪乳杆菌，更优选类干酪乳杆菌CNCM I-2116。

已经证实，本发明的微生物尤其显示下列特性：它们是革兰氏阳性，触酶阴性，NH₃形成精氨酸阴性，二氧化碳产生阴性，它们产生L(+)乳酸，能够在胆汁盐浓度达约0.4％时生长，可以基本上防止导致腹泻的细菌定居于肠道细胞，导致腹泻的细菌如致肠病大肠杆菌等病原性大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌等沙门氏菌。

新微生物可以用来制备多种可摄食的支持物材料，如牛奶、酸奶、凝乳、发酵牛奶、牛奶基发酵产品、发酵谷物基产品、牛奶基粉末、婴儿配方食品，在支持物中的含量可以为约10⁵cfu/g到约10¹¹cfu/g。在本发明中，cfu代表菌落形成单位，其定义是通过在琼脂平板上的微生物计数获得的细菌细胞数量。

本发明也提供含有至少一种具有上述特性的乳杆菌菌株和/或含有微生物已在其中生长的培养物上清或其一个级分的食品或药物组合物。

为了制备本发明的食品组合物，至少一种本发明的乳杆菌菌株被包含在合适的支持物中，含量为约10⁵cfu/g到约10¹¹cfu/g，优选约10⁶cfu/g到约10¹⁰cfu/g，更优选约10⁷cfu/g到约10⁹cfu/g。