[发明专利]农杆菌介导的棉花转化的改进方法

权利要求书

1.一种用于产生转基因棉花植物的方法，该方法包括在棉花胚胎发生愈伤组织与农杆菌细胞共培养之前或共培养期间，在植物酚类化合物存在下培养该农杆菌细胞的步骤，所说的农杆菌细胞含有可操作地连接到至少一个T-DNA边界上的目标DNA片段。

2.一种用于产生转基因棉花植物的方法，所说的方法包括：a)在植物酚类化合物存在下共培养棉花胚胎发生愈伤组织与农杆菌细胞，共培养时间是足以产生包含一种转化的棉花细胞的胚胎发生愈伤组织的一段时间，所说的农杆菌细胞包含可操作地连接到至少一个T-DNA边界上的目标DNA片段，和b)从所说的转化细胞再生转基因棉花植物。

3.权利要求书2的方法，其中所说的植物酚类化合物存在的浓度范围从大约50μM到大约400μM。

4.权利要求书2的方法，其中所说的农杆菌细胞在所述酚类化合物存在下共培养大约3至4天。

5.权利要求书2的方法，其中所说的胚胎发生愈伤组织来源于棉花籽苗的下胚轴。

6.权利要求书2的方法，其中所说的植物酚类化合物选自下组物质：乙酰丁香酮，α-羟基乙酰丁香酮，芥子酸，丁香酸，阿魏酸，邻苯二酚，对-羟基苯甲酸，β-二羟基苯甲酸，3，4-二羟苯甲酸，邻苯三酚，没食子酸和香草醛。

7.权利要求书6的方法，其中所说的植物酚类化合物是乙酰丁香酮。

8.权利要求书2的方法，其中所说的农杆菌细胞是根癌农杆菌菌株C58C1(pEHA101)，其还包含目标DNA片段。

9.权利要求书2的方法，该方法还包括将所说的转基因棉花植物与另一棉花植物杂交的步骤。

10.一种通过农杆菌介导的转化产生转基因棉花植物的方法，该方法包括共培养农杆菌细胞和棉花胚胎发生愈伤组织，该农杆菌细胞含有可操作地连接到至少一个T-DNA边界上的目标DNA片段，其特征在于所述共培养在植物酚类化合物的存在下进行。

11.植物酚类化合物在棉花胚胎发生愈伤组织的农杆菌介导的转化上的用途。

12.根据权利要求10的用途，其中所说的植物酚类化合物是乙酰丁香酮。

13.一种通过农杆菌介导的转化产生转基因棉花植物的方法，其特征在于在植物酚类化合物存在下共培养农杆菌细胞与棉花胚胎发生愈伤组织，所说的农杆菌细胞含有可操作地连接到至少一个T-DNA边界上的目标DNA片段。