[发明专利]1,3－丙二醇脱氢酶突变体

权利要求书

1.一种突变1，3-丙二醇脱氢酶，与相应的野生型1，3-丙二醇脱氢酶相比，其对1，3-丙二醇的米氏常数有了提高。

2.权利要求1的突变1，3-丙二醇脱氢酶，其米氏常数大约是野生型的3倍。

3.权利要求1的突变1，3-丙二醇脱氢酶，其对1，3-丙二醇的米氏常数大约是80mM。

4.权利要求1的突变1，3-丙二醇脱氢酶，其可从ATCC编号PTA-92的蟑螂埃希氏菌获得。

5.权利要求1的突变1，3-丙二醇脱氢酶，其具有相当于蟑螂埃希氏菌中如图3所示的105位残基从His到Leu的突变。

6.权利要求1的突变1，3-丙二醇脱氢酶，其包含如SEQ ID NO：2所示序列的氨基酸。

7.编码具有如SEQ ID NO：2所示序列的突变1，3-丙二醇脱氢酶的分离的核酸。

8.权利要求7的分离的核酸，其具有如SEQ ID NO：1所示的序列。

9.表达载体，其包含权利要求7的分离的核酸。

10.宿主细胞，其包含权利要求9的表达载体。

11.权利要求10的宿主细胞，其包括柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、梭菌属、克雷伯氏菌属、气杆菌属、乳杆菌属、曲霉属、酵母属、裂殖酵母属、接合酵母属、毕赤氏酵母属、克鲁维酵母属、假丝酵母属、汉森酵母属、德巴利酵母属、毛霉属、球拟酵母属、甲基细菌属、埃希氏杆菌属、沙门氏菌属、芽孢杆菌属、链霉菌属和假单胞菌属。

12.权利要求10的宿主细胞，其中所述突变1，3-丙二醇脱氢酶包含相当于蟑螂埃希氏菌中如图3所示105位残基从His到Leu的突变。

13.权利要求12的宿主细胞，其中所述的突变1，3-丙二醇脱氢酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

14.在微生物中生产1，3-丙二醇的方法，包括以下步骤：

I，得到含有和相应野生型PDD相比其对1，3-丙二醇的米氏常数有所提高的突变1，3-丙二醇脱氢酶(PDD)的微生物，该微生物含有至少一种能表达脱水酶活性的基因，和

II，将该微生物和碳底物一起培养。

15.权利要求14的方法，其中所述突变1，3-丙二醇脱氢酶包含相当于蟑螂埃希氏菌中如图3所示的105位残基从His到Leu的突变。

16.权利要求15的方法，其中所述突变1，3-丙二醇脱氢酶包含如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

17.权利要求14的方法，其中所述突变1，3-丙二醇脱氢酶可以从ATCC保藏号为PTA-92的蟑螂埃希氏菌获得。

18.权利要求14的方法，其中所述微生物包括柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、梭菌属、克雷伯氏菌属、气杆菌属、乳杆菌属、曲霉属、酵母属、裂殖酵母属、接合酵母属、毕赤氏酵母属、克鲁维酵母属、假丝酵母属、汉森酵母属、德巴利酵母属、毛霉属、球拟酵母属、甲基细菌属、埃希氏杆菌属、沙门氏菌属、芽孢杆菌属、链霉菌属和假单胞菌属。

19.ATCC保藏号为PTA-92的分离的微生物。