[发明专利]位点专一性同位素标记的蛋白质、氨基酸、及其生物化学前体

权利要求书

1.式I化合物或其盐，其中

R¹为氧或NH₂；

R²选自下述基团：

其中R³为氢或ⁿCH₃；

虚线键代表第二价键；

m为0或1；

而n在各种情况下分别为13或14；所述分子式要满足以下条件：

(i)当R¹为NH₂时，连接R¹的虚线所代表的第二价键不存在，而与虚线键连接的氢存在；

(ii)当R¹为氧时，与R¹连接的虚线所代表的第二价键存在，而与虚线键连接的氢原子不存在；

(iii)当R¹为氧时，R²为B式，m为0；以及

(iv)当R¹为NH₂时，R³为氢或ⁿCH₃。

2.含有氨酰基残基的蛋白、蛋白片段或多肽，该氨酰基残基来源于权利要求1所述其中R¹为-NH₂的化合物。

3.式Ia化合物或其盐，其中R³为氢或ⁿCH₃，而n在各种情况下分别为13或14。

4.权利要求3所述的化合物，选自：

2-酮-4-(¹³C)-丁酸；

2-酮-3-(¹³C-甲基)-4-(¹³C)-丁酸；

2-酮-4-(¹⁴C)-丁酸；以及

2-酮-3-(¹⁴C-甲基)-4-(¹⁴C)-丁酸；或它们的盐。

5.式Ib化合物，其中

R²选自下述基团：其中R³为氢或ⁿCH₃；m为0或1；而n在各种情况下分别为13或14。

6.权利要求5所述的化合物，选自：

L-2-氨基-3-甲基-5-(¹³C)-戊酸；

L-2-氨基-3-甲基-5-(¹⁴C)-戊酸；

L-2-氨基-3-(¹³C-甲基)-5-(¹³C)-丁酸；

L-2-氨基-3-(¹⁴C-甲基)-5-(¹⁴C)-丁酸；

L-2-氨基-4-(¹³C-甲基)-5-(¹³C)-戊酸；以及

L-2-氨基-4-(¹⁴C-甲基)-5-(¹⁴C)-戊酸；或它们的盐。

7.含有一种或多种氨酰基残基的蛋白、蛋白片段、或多肽，其中所说的一种或多种氨酰基残基包括式IIb的化合物，其中R²选自下述基团：其中R³为氢或ⁿCH₃；m为0或1；而n在各种情况下分别为13或14。

8.制备式Ia化合物或其盐的方法，其中R³选自氢和ⁿCH₃，而n在各种情况下分别为13或14，该方法包括：a)将式IV化合物，与同位素标记的碘代甲烷(H₃ⁿCI)反应，产生式V化合物以及

b)除去叔丁基酯保护基和二甲基肼基保护基，生成2-酮-4-(ⁿC)-丁酸。

9.权利要求8所述的方法，还包括将b)步的反应产物成盐。