[发明专利]新的抗真菌剂和杀真菌剂及其制备方法和应用

说明书

                        描述

本发明涉及可由酵母获得的新的抗真菌剂和杀真菌剂，及其制备方法和应用。

由于最近几年真菌和/或酵母感染人的事件大大增加，而且还继续导致非期望的食品和动物饲料污染，因此选择性抗真菌剂显得极其重要。真菌病在细胞和体液防御系统必须保持在非完全功能水平的免疫抑制患者中具有特别严重的后果(Anaissie，1992；Meunier等人，1992；Wingard，1995)。真菌病极度危及感染了HIV-1(AIDS)的患者，他们非常频繁的死于由对人致病性的真菌和/或酵母引起的机会性传染疾病的晚期(Levy，1993)。目前用于治疗这些传染病的抗真菌剂(诸如两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑)引起相当大的副作用，因为它们破坏真核细胞质膜的结构完整性，由此也损害受感染的宿主生物体(Hector，1993)。此外，传统抗真菌剂的应用在很短时间内即导致氟康唑抗性的快速增加，并在对人致病性的微生物中快速传播，甚至构成不断增加的问题(Cameron等人，1993；Chavenet等人，1994；Maenza等人，1996；Pfaller等人，1994；Rex等人，1995；Troillet等人，1993)。因此，非常需要开发像细菌抗生素那样根据高度选择性而有所区别且如果有可能只攻击对人致病性的真菌和酵母的抗真菌剂。然而，既然高等生物体所有细胞过程中的大多数受在真核生物中具有高度功能同源性的基因产物的控制，因此“特异性抗真菌抗生素”的开发至今尚未成功(Kurz，1998；Komiyama等人，1998)。

选择性抗真菌剂的一个靶子是酵母细胞壁的β-1，3-D-葡聚糖，它对于细胞的机械和渗透稳定性是必不可少的，但是不存在于高等真核生物中，由此构成“唯一致命的弱点”，可用于控制致病酵母(Roemer等人，1994)。即使由此对选择性参与酵母和真菌细胞壁结构的物质非常感兴趣，仍没有抗生素样抑制剂用于控制真菌病。早在本世纪初就发现了细菌抗生素生产者，而直到60年代初才通过鉴定所谓的放毒者酵母观察到酵母中的相似效果(Bevan和Makower，1963)：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的毒素生成放毒者菌株生成并分泌称为“放毒者毒素”的蛋白质，这种蛋白质以受体依赖过程破坏敏感酵母(Bussey，1991；Tipper和Schmitt，1991)。在酿酒酵母中，生成毒素的能力基于呼肠孤病毒样双链RNA病毒的感染，这种病毒以高拷贝数稳定存在于酵母细胞质中，而不显著损害真核宿主细胞(Tipper和Schmitt，1991)。至今为止已知的酿酒酵母的三类放毒者毒素(K1、K2、K28)是非糖基化的α/β异二聚体，由被感染细胞翻译成高分子前毒素原(preprotoxin)，并在胞内分泌途径中通过复杂修饰加工成有生物活性的放毒者蛋白质(Hanes等人，1986；Dignard等人，1991；Schmitt和Tipper，1995)。酿酒酵母毒素的毒性作用基于破坏膜完整性(毒素K1、K2)或通过直接抑制DNA合成而阻滞细胞循环(毒素K28)(Bussey，1991；Schmitt和Compain，1995；Schmitt等人，1996)。即使K1、K2、和K28类的放毒者毒素在作用模式和物理化学特性方面彼此显著不同，它们仍然具有共同特征：作用谱窄，主要破坏密切相关物种的敏感酵母。这种有限的作用谱依据的是迄今为止已表征的啤酒酵母放毒者毒素必须与酵母细胞壁和细胞质膜水平上不同受体群相互作用从而得以破坏敏感靶细胞这一事实。酵母细胞壁的主要毒素受体是高度分支的β-1，6-D-葡聚糖或细胞壁甘露糖蛋白质的外层甘露三糖侧链(Bussey，1991；Schmitt和Radler，1987，1988)。