[发明专利]通过提高细胞NADPH生产L-氨基酸的方法无效
申请号: | 00810748.3 | 申请日: | 2000-07-21 |
公开(公告)号: | CN1372597A | 公开(公告)日: | 2002-10-02 |
发明(设计)人: | M·R·奥唐诺休;P·D·汉克 | 申请(专利权)人: | 阿彻-丹尼尔斯-米德兰公司 |
主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12P13/08;C12N9/92;C12N9/04;C12N9/18 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 唐伟杰 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 提高 细胞 nadph 生产 氨基酸 方法 | ||
1.L-氨基酸的生产方法,包括:培养与未改变的细菌细胞相比其NADPH量有所增加的经改变细菌细胞,其中所述经改变细菌细胞的L-氨基酸产量高于来自未改变细菌细胞的产量。
2.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞中流经戊糖磷酸途径氧化支路的碳流增加了。
3.权利要求2的方法,其中所述经改变细菌细胞中选自下组的一种或多种酶的量增加了:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、内酯酶、和6-磷酸葡糖酸脱氢酶。
4.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞中流经糖酵解途径的碳流减小了。
5.权利要求4的方法,其中所述经改变细菌细胞中6-磷酸葡糖异构酶酶促活性降低了。
6.权利要求1的方法,其中来自所述经改变细菌细胞的所述L-氨基酸产量比所述未改变细菌细胞高大约1%-大约100%。
7.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞具有突变型pgi基因。
8.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞是如下生成的:(a)亚克隆pgi基因的内部区域;并(b)通过同源重组将由步骤(a)产生的载体插入细菌基因组。
9.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞中苹果酸酶的量增加了。
10.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞中异柠檬酸脱氢酶的量增加了。
11.权利要求1的方法,其中所述经改变细菌细胞是谷氨酸棒杆菌细胞。
12.权利要求11的方法,其中所述谷氨酸棒杆菌细胞具有突变型pgi基因。
13.权利要求1的方法,其中所述L-氨基酸包括L-赖氨酸。
14.包含pDPTpgi2的载体。
15.生产具有突变型pgi基因的细菌细胞的方法,包括:(a)将pgi基因的内部区域亚克隆到自杀载体中;并(b)将由步骤(a)产生的载体插入细菌基因组,由此生成具有突变型pgi基因的细菌细胞。
16.权利要求15的方法,其中所述自杀载体选自包括pBGS131和含可选择标记的基于Col E1的复制子。
17.按照权利要求15的方法生成的经改变细菌细胞。
18.L-氨基酸的生产方法,包括:培养与未改变细菌细胞相比其6-磷酸葡糖异构酶酶促活性有所降低的经改变细菌细胞,其中来自所述经改变细菌细胞的L-氨基酸产量高于来自未改变细菌细胞的产量。
19.权利要求18的方法,其中来自所述经改变细菌细胞的所述L-氨基酸产量比所述未改变细菌细胞高大约1%-100%。
20.权利要求18的方法,其中所述经改变细菌细胞具有突变型pgi基因。
21.权利要求18的方法,其中所述经改变细菌细胞是如下生成的:(a)亚克隆pgi基因的内部区域;并(b)通过同源重组将由步骤(a)产生的载体插入细菌基因组。
22.权利要求18的方法,其中所述经改变细菌细胞是谷氨酸棒杆菌细胞。
23.权利要求18的方法,其中所述L-氨基酸包括L-赖氨酸。
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