[发明专利]蛋白质生产

权利要求书

1.用于重组生产异源多肽的方法，包括：

(i)培养用包含编码融合蛋白的核酸分子的表达载体转化的细菌宿主细胞，所述融合蛋白包含展示瘟病毒自我蛋白酶N^pro自我蛋白酶解功能的第一种多肽与以能够通过第一种多肽的自我蛋白酶解活性由融合蛋白切割下来的方式连接于第一种多肽C末端的第二种多肽，该第二种多肽是异源多肽，其中培养是在融合蛋白得以表达且相应胞质包涵体得以形成的条件下进行的；

(ii)由宿主细胞分离包涵体；

(iii)溶解分离的包涵体；

(iv)稀释溶解物以产生反应液，其中在反应液中通过自我蛋白酶解切割融合蛋白获得异源多肽；并

(v)分离切割后的异源多肽。

2.权利要求1的方法，其中瘟病毒选自下组：CSFV、BDV、和BVDV。

3.权利要求2的方法，其中瘟病毒是CSFV。

4.权利要求3的方法，其中第一种多肽包含如下氨基酸序列(1)-MELNHFELLYKTSKQKPVGVEEPVYDTAGRPLFGNPSEVHPQSTLKLPHDRGRGDIRTTLRDLPRKGDCRSGNHLGPVSGIYIKPGPVYYQDYTGPVYHRAPLEFFDEAQFCEVTKRIGRVTGSDGKLYHIYVCVDGCILLKLAKRGTPRTLKWIRNFTNCPLWVTSC-(168)，

或其具有自我蛋白酶解活性的衍生物的氨基酸序列。

5.权利要求3的方法，其中第一种多肽包含CSFV自我蛋白酶N^pro的Glu22-Cys168氨基酸序列或其具有自我蛋白酶解活性的衍生物，其中第一种多肽以Met作为N末端，且异源多肽直接连接CSFV自我蛋白酶N^pro的氨基酸Cys168。

6.权利要求3的方法，其中第一种多肽包含CSFV自我蛋白酶N^pro的Pro17-Cys168氨基酸序列或其具有自我蛋白酶解活性的衍生物，其中第一种多肽以Met作为N末端，且异源多肽直接连接CSFV自我蛋白酶N^pro的氨基酸Cys168。

7.权利要求1-6任一项的方法，其中核酸分子是DNA分子。

8.权利要求1-7任一项的方法，其中表达载体是质粒。

9.权利要求1-8任一项的方法，其中细菌宿主细胞是大肠杆菌细胞。