[发明专利]定向基因去除无效
申请号: | 00813040.X | 申请日: | 2000-09-15 |
公开(公告)号: | CN1375010A | 公开(公告)日: | 2002-10-16 |
发明(设计)人: | P·迈耶;E·祖布科 | 申请(专利权)人: | 利兹大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/64;C12N15/65;A01H5/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 徐迅 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定向 基因 去除 | ||
1.一种在转基因整合入基因组后去除转基因部分的方法,其特征在于,包括步骤:将λ噬菌体的附着P区域(attP)置于所述转基因部分的两侧,和诱导染色体内发生各侧翼attP区域之间的同源重组,从而除去位于其间的所述的转基因部分。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的转基因含有标志基因和/或载体序列和/或其它外源辅助核酸。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述的标志基因赋予针对抗菌素和/或除草剂的抗性。
4.如权利要求1、2或3任一所述的方法,其特征在于,所述的标志基因参与特异性生物合成途径和/或参与环境忍耐力。
5.如权利要求1-4任一所述的方法,其特征在于,所述的标志基因选自:nptII、Ble、dhfr、cat、aphIV、SPT、aacC3、aacC4、bar、EPSP、bxn、psbA、tfdA、DHPS、AK、sul、crsl-1和tdc。
6.如权利要求1-5任一所述的方法,其特征在于,所述的方法从转基因除去一个以上的标志基因和/或载体序列和/或外源核酸部分,且每个被删除部分的侧翼都有attP区域。
7.如权利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述的attP区域含有位于λ噬菌体的27492和27844之间的352个碱基对或其功能相当的片段。
8.如权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,所述的attP区域含有SEQID NO:1所示的核酸序列或其功能相当的片段、或在严格条件下能与SEQ IDNO:1杂交且具有作为attP区域功能的核酸,或因遗传密码简并性而与SEQ IDNO:1的DNA有差异且起attP区域作用的核酸。
9.如权利要求1-8任一所述的方法,其特征在于,所述的attP区域是在盒内的。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的盒还含有转化增强序列或其片段,以增强同源和异常重组。
11.如权利要求9或10所述的方法,其特征在于,所述的盒还含有效应基因如oryazcyctastin-I或与其功能等同物。
12.如权利要求1-11任一所述的方法,其特征在于,所述的基因组是植物基因组。
13.一种用权利要求1-12任一所述的方法产生的植物、植物细胞或植物组织。
14.一种包括进行权利要求12所述的方法产生植物或提供权利要求13所述的植物或植物细胞或植物组织的方法,其特征在于,所述的方法包括生长植物和/或收获其产物。
15.含有重组attP区域的植物或植物细胞或植物组织。
16.attP重组盒,其特征在于,包含侧翼是attP区域的标志基因和/或载体序列和/或外源辅助核酸。
17.权利要求16所述的attP重组盒的用途,其特征在于,用于除去整合入植物基因组的部分。
18.一种待转基因整合入植物基因组后将其除去的试剂盒,其特征在于,含有如权利要求16所述的attP重组盒。
19.含有整合入基因组的重组转基因的植物或植物细胞或植物组织,其特征在于,所述的转基因在其各端与λ噬菌体attP区域相连。
20.如权利要求19所述的植物或植物细胞或植物组织,其特征在于,还包含一个所示的λ噬菌体attP区域和一个整合入其基因组的效应转基因。
21.如权利要求20所述的植物或植物细胞或植物组织,其特征在于,所述的λ噬菌体attP区域和一个转基因不与标志基因和/或载体序列和/或其它外源辅助核酸相连。
22.如权利要求19-21任一所述的植物或植物细胞或植物组织,其特征在于,所述的转基因还与能增强同源和异常重组的转化增强序列或其片段相连。
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