[发明专利]干细胞因子纯化方法无效
申请号: | 01102478.X | 申请日: | 2001-02-07 |
公开(公告)号: | CN1368507A | 公开(公告)日: | 2002-09-11 |
发明(设计)人: | 吴军;马清钧 | 申请(专利权)人: | 深圳科兴生物工程股份有限公司;中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47 |
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地址: | 518057 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 因子 纯化 方法 | ||
1.一种纯化溶液中人干细胞因子(SCF)的方法,包括:(a)将含人干细胞因子的溶液进行阴离子交换,由此得含SCF的级份;(b)将来含SCF级份进行疏水色谱分离,由此得高度纯化的SCF的级份。
2.权利要求的1的方法,进一步包括:将含SCF的级份进行凝胶色谱分离,由此得含SCF纯度较高的级份。
3.权利要求1的方法,更进一步包括:(a)将含人干细胞因子的溶液进行阴离子交换,由此得含SCF的级份;(b)将来源于(a)的含SCF级份进行凝胶色谱分离,由此得含SCF级份。(c)将来源于(b)的含SCF级份进行疏水色谱分离,由此得高度纯化的SCF的级份。
4.权利要求1、2、3的方法,其中SCF由原核表达体系生产,并由包涵体蛋白变性和复性获得。
5.一种用阴离子交换色谱从含变性剂的人干细胞因子(SCF)稀溶液中快速浓缩,分离SCF的方法,其中变性剂可以为0.2-8mol/L的尿素。
6.权利要求11的方法其中变性剂为0.5-3mol/L的尿素。
7.一种从含SCF异构体的溶液中分离天然构型SCF的方法,包括:将含不同SCF异构体的溶液,进行疏水色谱分离,得到天然构型SCF的级份。
8.权利要求1、2、3、5的方法,其中的阴离子交换色谱由固定在载体底物上的二乙氨乙基(Diethylaminoethyl)交换基构成。
9.权利要求2、3的方法,其中的凝胶色谱具有1至600KD的极份范围。
10.权利要求2、3的方法其中的凝胶色谱介质为交联葡聚糖。
11.权利要求1、2、3、7的方法,其中的疏水色谱由固定在载体底物上的苯基(phenyl)交换基构成。
12.权利要求8、11的方法,其中载体底物为交联琼脂糖。
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