[发明专利]一种转化大粒种子植物的方法及其应用

权利要求书

1．一种转化大粒种子植物的方法，其特征是该方法主要包括以下步骤：

(1)建立受体体系，得到受体植株；

(2)以受体植株小苗为材料，在适宜时机剥去芽鞘或子叶及幼叶，裸露出茎尖作为转化受体；

(3)制备转化用载体；

(4)采用农杆菌中介法转化目的基因；

(5)将转化后的小苗移栽到花盆中，覆盖无土介质，浇灌营养液；

(6)待植株长出新叶后喷洒选择剂，筛选出表现抗性的转基因植株；

(7)将转基因植株移植到温室或田间，在适宜条件下得到该转基因植株的子代植株；

(8)鉴定转基因植株及其子代的特性。

2．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是禾谷类作物植物；

3．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是玉米、小麦、水稻、高粱、大麦、燕麦、黑麦；

4．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是豆科作物植物；

5．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是大豆、花生、绿豆、菜豆、豌豆、四季豆、蚕豆、绿豆；

6．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是经济类作物植物；

7．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是棉花、向日葵、蓖麻；

8．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是瓜类作物植物；

9．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是西瓜、黄瓜、南瓜、西葫芦、香瓜、番瓜、丝瓜、佛手瓜；

10．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是果树植物；

11．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是杏、桃、李、樱桃；

12．权利要求1的方法，其中所说的大粒种子植物是经济类林木植物；

13．权利要求1的方法，其中所说的“建立受体体系”包括如下途径(可根据植物品种的不同分别选择)：

(1)通过萌发成熟种子获得转基因受体植株；

(2)通过萌发成熟种子胚获得转基因受体植株；

(3)通过培养未成熟胚获得转基因受体植株；

(4)将双子叶植物的种子播种在花盆或苗圃中。

14．权利要求1的方法，其中所说的“适宜时机”因植物种类而异，且以植物生长点处于最佳感受态时为最佳；

15．权利要求1的方法，其中所说的“农杆菌中介法”包括浸泡法、浸蘸法、注射法、超声波处理-农杆菌感染法、射线处理-农杆菌感染法、农杆菌感染-真空导入法；

16．权利要求1的方法，其中所说的“无土介质”是蛭石；

17．权利要求1的方法，其中所说的“植株长出新叶”是植株长出3-4片新叶；

18．权利要求1的方法，其中所说的“选择剂”是除草剂；

19．权利要求1的方法，其中所说的“选择剂”是绿黄隆；

20．权利要求1的方法，其中所说的“抗性”是对除草剂的抗性；

21．权利要求1的方法，其中所说的“抗性”是对绿黄隆的抗性；

22．一种生产大粒种子植物的转基因植株及其子代的方法，其特征是该方法应用权利要求1的转化大粒种子植物的方法；

23．一种产生大粒种子植物的转基因自交系的方法，其特征是该方法应用权利要求1的转化大粒种子植物的方法；

24．一种避免使用抗生素抗性基因的转化大粒种子植物的方法，其特征是该方法应用权利要求1的转化大粒种子植物的方法；

25．一种有利于植物转基因操作和转基因植物产品通过安全性鉴定的方法，其特征是该方法应用权利要求24的避免使用抗生素抗性基因的转化大粒种子植物的方法。