[发明专利]鉴别细胞特异性靶结构的方法无效

专利信息
申请号: 01109720.5 申请日: 2001-03-23
公开(公告)号: CN1334463A 公开(公告)日: 2002-02-06
发明(设计)人: 瓦尔特·舒伯特 申请(专利权)人: 瓦尔特·舒伯特
主分类号: G01N33/50 分类号: G01N33/50;G01N33/68;C12Q1/02
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 代理人: 林晓红
地址: 联邦德国*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 鉴别 细胞 特异性 结构 方法
【权利要求书】:

1、一种用于鉴别细胞特异性靶结构的方法,所述方法包括如下步骤:

(a)将包括至少一种标记分子的试剂溶液Y1自动沉积在含有来自细胞或组织样品的细胞和/或细胞膜的物体X1上;

(b)使试剂溶液Y1反应,并自动检测用试剂溶液Y1标记的物体X1的至少一种标记模式;

(c)在检测该标记模式之前或之后除去所述试剂溶液Y1,并用其他试剂溶液Yn(n=2,3,…,N)重复步骤(a)和(b),每种试剂溶液均含有所述的至少一种标记分子和/或至少另一种标记分子;

(d)组合步骤(b)中检测的标记模式以得到物体X1的复合分子组合模式;

(e)用含有来自不同的细胞或组织样品的其他细胞和/或其他细胞膜的至少另一种物体Xn(n=2,3,…,N)重复步骤(a)至(d);

(f)确定物体X1和物体Xn的组合模式之间的至少一种差异;

(g)鉴别其标记模式导致步骤(f)中确定的差异的至少一种试剂溶液Y1或Yn;

(h)选择来自不同于步骤(f)确定的物体Xn的细胞或组织样品的细胞和/或细胞膜的匀浆物中的由至少步骤(g)鉴别的试剂溶液Y1或Yn的标记分子结合的分子或分子复合物;以及

(i)生物化学鉴定步骤(h)中选择的分子或分子复合物。

2、权利要求1的方法,其中在步骤(h)之前,步骤(h)所用的匀浆物通过分子或分子复合物分离方法、特别是蛋白质分离方法分成各个匀浆物成分。

3、前述任一项权利要求的方法,其中所述物体X1含有来自患者的细胞或组织样品的细胞和/或细胞膜,且至少一种其他的物体Xn含有来自健康测试者的细胞或组织样品的细胞和/或细胞膜。

4、前述任一项权利要求的方法,其中所述方法包括如下平行步骤:

(x)制备物体X1和Xn所用的细胞和/或细胞膜所来自的每种所述细胞或组织样品的每一样品部分的蛋白质表达分布图,并将物体X1相关的蛋白质表达分布图与物体Xn相关的蛋白质表达分布图相比较,这种比较将显示至少一种差异。

5、权利要求4的方法,其中所述方法在步骤(x)之后包括如下步骤:

(y)检查导致步骤(x)中确定的差异的至少一种蛋白质和/或至少一种蛋白质修饰是否结合步骤(g)中鉴别的试剂溶液Y1或Yn的至少一种标记分子。

6、权利要求4的方法,其中步骤(a)和/或步骤(c)所用的至少一种标记分子与导致步骤(x)检测的差异的至少一种蛋白质和/或至少一种蛋白质修饰结合。

7、前述任一项权利要求的方法,其中步骤(a)和/或步骤(c)所用的至少一种标记分子是荧光素缀合的。

8、前述任一项权利要求的方法,其中步骤(a)和/或步骤(c)所用的至少一种标记分子是抗体。

9、权利要求8的方法,其中所述抗体得自抗体文库,该抗体文库是原初型或非原初型。

10、前述任一项权利要求的方法,其中步骤(a)和/或步骤(c)所用的至少一种标记分子是配体。

11、权利要求10的方法,其中所述配体得自配体文库,该配体文库是原初型或非原初型。

12、前述任一项权利要求的方法,其中在步骤(c)除去试剂溶液之后,进行一漂洗步骤,该步骤中将一种漂洗溶液沉积在物体X1上,一段时间后除去。

13、前述任一项权利要求的方法,其中步骤(d)通过计算机辅助成象覆盖图进行。

14、前述任一项权利要求的方法,其中所述方法包括随机重复的漂白循环,特别是在步骤(b)之后。

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