[发明专利]二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上的特定序列

权利要求书

1.一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于该方法是采用核苷酸整合酶介导DNA序列靶向整合到真核细胞染色体基因组上特定DNA序列的方法。

2.根据权利要求1所述的一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于其中所述的核苷酸整合酶是由一种二类内含子RNA与该二类内含子编码的蛋白质组成。

3.根据权利要求1所述的一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于其中所述的二类内含子是乳酸乳球菌的二类内含子Ll.ltrB，所说的二类内含子编码的蛋白质是该Ll.ltrB编码的蛋白质LtrA。

4.根据权利要求3所述的二类内含子Ll.ltrB RNA和蛋白质LtrA，其特征在于二类内含子Ll.ltrB RNA和蛋白质LtrA能通过体外合成的方式，也能通过体内表达方式产生。

5.根据权利要求3所述的LtrA蛋白质，其特征在于LtrA蛋白质能添加核定位信号修饰。

6.根据权利要求1所述的一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于其中所述的二类内含子能添加插入启动子或表达盒子修饰。

7.根据权利要求1所述的一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于其中所述的Ll.ltrB RNA能根据所说的染色体基因组上选择的序列进行一些修饰，使之互补结合。

8.根据权利要求1所述的一种二类内含子靶向整合真核细胞染色体基因组上特定序列的方法，其特征在于其中所述的真核细胞染色体基因组上特定序列的二类内含子插入位点上游的第21个核苷酸为G、二类内含子插入位点下游的第5个核苷酸为T。