[发明专利]发酵生产核苷酸的方法

权利要求书

1.生产核苷5’-磷酸酯的方法，包括在培养基中培养属于埃希氏菌属、具有产核苷5’-磷酸酯能力的细菌，以在培养基中产生和积累核苷5’-磷酸酯，并由培养基中收集核苷5’-磷酸酯，所述细菌中ushA基因和aphA基因功能异常。

2.权利要求1的生产核苷5’-磷酸酯的方法，其中，向ushA和aphA基因中引入突变或破坏该基因以使其功能异常。

3.权利要求1或2的生产核苷5’-磷酸酯的方法，其中，核苷5’-磷酸酯选自5’-肌苷酸或5’-鸟苷酸。

4.属于埃希氏菌属、具有生成核苷5’-磷酸酯能力的细菌，其中，ushA和aphA基因被破坏。

5.权利要求4的属于埃希氏菌属的细菌，其中，核苷5’-磷酸酯选自肌苷酸或鸟苷酸。

6.寻找影响核苷5’-磷酸酯积累的5’-核苷酸酶基因的方法，包括以下步骤：

在含有第一种核苷5’-磷酸酯作为唯一碳源的基本培养基中和含有第二种核苷5’-磷酸酯作为唯一碳源的基本培养基中，培养亲本微生物菌株和已知的5’-核苷酸酶缺失的其衍生菌株，以观察亲本菌株和衍生菌株中的基因表达图谱，

计算亲本菌株和衍生菌株培养在含有第一种核苷5’-磷酸酯作为唯一碳源的培养基中时各种基因的表达量的比例，和亲本菌株和衍生菌株培养在含有第二种核苷5’-磷酸酯作为唯一碳源的培养基中时各种基因的表达量的比例，获得其乘积，

选择具有较大乘积值的一个或多个基因。

7.权利要求6的寻找5’-核苷酸酶基因的方法，其中，第一种核苷5’-磷酸酯为5’-肌苷酸，第二种核苷5’-磷酸酯为鸟苷酸。

8.权利要求6或7的寻找5’-核苷酸酶基因的方法，还包括由选定基因中选择可以编码蛋白转运进入周质所需的信号序列的基因。