[发明专利]诊断试验

权利要求书

1.检测样品中HBV-核酸靶序列的方法，所述方法包括：使样品经受变性条件以产生单链形式的所述靶序列；使该变性样品与一套引物接触，所述引物套含有至少两种引物，其中至少一种引物能与所述靶序列的一条链杂交，其中至少一种其它的引物能与所述第一条链的互补链杂交，其中所述引物能从它们的3’末端延伸，形成与每种所述引物所杂交的链互补的延伸产物；使样品经受有利于扩增的条件，产生含有互补延伸产物的扩增产物；然后检测扩增产物的存在，其中所述扩增产物的存在指示所述HBV-核酸靶序列的存在。

2.权利要求1的方法，其中所述引物与以下区域杂交，所述区域对应于或侧翼于编码HbsAg之完整或部分核苷酸序列内的核苷酸序列。

3.权利要求2的方法，其中所述引物与以下区域杂交，所述区域对应于或侧翼于编码HbsAg之核苷酸序列的一部分中的保守核苷酸序列。

4.权利要求1或2或3的方法，其进一步包括首先使样品经受逆转录条件以从HBV-mRNA产生单链或双链cDNA分子。

5.权利要求1的方法，其中所述引物之一用能给出可鉴定信号的报道分子标记，所述引物之另一用可捕获的组分标记。

6.检测样品中HBV-DNA靶序列的方法，所述方法包括：将所述样品导入反应管中，所述反应管含有一种固定于固体支持物上的引物，和第二种位于溶液相中的引物，其中这两种引物都能与HBV基因组保守区域之内、其邻侧或邻近区中HBV-DNA单链的互补核苷酸序列杂交，其中所述溶液相引物用能给出可鉴定信号的报道分子标记；使反应管经受有利于扩增的条件；然后检测可鉴定信号的存在，其中所述信号的存在指示HBV-DNA的存在。

7.从相同或不同HBV毒株或变体中检测一种或多种HBV-DNA靶序列的方法，所述方法包括：使据推测含有单链形式的HBV-衍生DNA的样品与两种或多种引物接触，所述引物单独地，或以列阵的形式固定于反应管中的固体支持物上，其中反应管另外还含有溶液相引物，该引物具有固定于所述固体支持物上的配对物，其中固相引物及其溶液相的配对引物能在扩增条件下扩增HBV-DNA的区域，其中溶液相引物携有能给出可鉴定信号的报道分子，使得固体支持物上确定位置处信号的存在能鉴定特定的HBV分离株或变体。

8.固定于固体支持物上的两种或多种寡核苷酸引物的一种列阵，所述引物能与HBV-衍生DNA的互补核苷酸序列杂交。

9.权利要求8的列阵，其中列阵由在基质上坐标为(x₁y₁)，(x₂y₂)...(x_ny_n)的式a₁a₂...a_n定义，其中a₁a₂...a_n表示相同或不同的寡核苷酸，总共为n个寡核苷酸，每个寡核苷酸可由方格坐标(x₁y₁)，(x₂y₂)...(x_ny_n)确定，其中寡核苷酸具有由b₁b₂...b_n定义的扩增配对物，从而使寡核苷酸a₁b₁，a₂b₂...a_nb_n能与HBV-DNA的互补链杂交，其中间插的DNA含有在两种或多种HBV变体，如HBsAg变体之间保守的核苷酸序列，其中所述基质可用于检测特定的HBV因子，所述因子的特征在于携有所述HBV-衍生DNA的保守扩增区域。

10.权利要求1的方法，其中所述引物选自<400>1和<400>2，或者与其具有至少约70％相似性的引物，或能在低严谨条件下与<400>1或<400>2杂交的引物。