[发明专利]一种建立人/山羊造血干细胞异种移植模型的方法有效
申请号: | 01132231.4 | 申请日: | 2001-11-19 |
公开(公告)号: | CN1353994A | 公开(公告)日: | 2002-06-19 |
发明(设计)人: | 曾凡一;黄淑帧;曾溢滔 | 申请(专利权)人: | 上海凡华生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K35/14 | 分类号: | A61K35/14;C12N5/00 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 200040 上海市北京*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 建立 山羊 造血 干细胞 移植 模型 方法 | ||
1.一种建立人/山羊造血干细胞异种移植模型的方法,其特征在于首先收集新鲜人脐血,然后分离人造血干细胞HSC后,将其移植入胎山羊腹腔中,抽取分娩后胎山羊静脉血检测后,得体内嵌合有人HSC其含量扩增至1000-10000倍,稳定保持其表型10个月以上,处于不完全分化状态的人/山羊造血干细胞异种移植模型。
2.按权利要求1所述的方法,其特征在于从收集人脐血到移植人HSC入胎山羊腹腔中的整个过程在8-16小时内完成。
3.按权利要求1所述的方法,其特征在于所述的静脉血检测是胎羊分娩后3个月、6个月、10个月分别抽取。
4.一种权利要求1所述的方法,其步骤如下:
1)分离新鲜人脐血其中单个核细胞和离心分离获得人HSC;
2)将分离获得的人HSC移植于胎山羊,检测构建模型山羊体内人HSC的量及其HSC的分化程度,包括FACS分析、DNA分析及对移植流产的胎羊的组织学和免疫组织化学检查和对被移植胎羊的母体血液学检查。
5.按权利要求4所述的方法,其中DNA分析包括抽提DNA、设计PCR引物、检测引物特异性、和PCR检测人/山羊造血干细胞嵌合模型的巢式及RT-PCR检测人/山羊造血干细胞嵌合模型。
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