[发明专利]以Taq酶对DNA和RNA病原进行同步PCR检测的方法无效
申请号: | 01133528.9 | 申请日: | 2001-09-30 |
公开(公告)号: | CN1346893A | 公开(公告)日: | 2002-05-01 |
发明(设计)人: | 王业富;庞代文;沈钧涛 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/25 |
代理公司: | 武汉科宏专利事务所 | 代理人: | 黄瑞棠,王敏锋 |
地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | taq dna rna 病原 进行 同步 pcr 检测 方法 | ||
1、一种以Taq酶对DNA和RNA病原进行同步PCR检测的方法,其特征在于:
①蛋白质裂解试剂组成为:1%~10%的十二烷基硫酸钠(SDS)、2~20%NP-40、1~10%吐温-20表面活性剂与Tris或磷酸缓冲液的两两组合,再加入RNA酶抑制剂焦碳酸二乙酯(DEPC);
②采用蛋白质裂解试剂和煮沸法同步提取病毒核酸DNA和RNA;
③利用Taq DNA聚合酶本身的聚合酶活性和逆转录活性,以上述过程制备的病毒核酸为模板直接进行PCR扩增,得到所需的核酸片断;
④得到核酸片断后,经过电泳或杂交进行基因检测;
⑤检验流程为模板制备、PCR扩增、检测。
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