[发明专利]疯草中苦马豆素的提纯工艺无效
申请号: | 02114590.3 | 申请日: | 2002-05-24 |
公开(公告)号: | CN1396161A | 公开(公告)日: | 2003-02-12 |
发明(设计)人: | 曹光荣;童德文;赵宝玉;葛鹏斌 | 申请(专利权)人: | 杨凌大农生物技术有限公司 |
主分类号: | C07D311/58 | 分类号: | C07D311/58 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人: | 李郑建 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 疯草中苦马豆素 提纯 工艺 | ||
一、所属领域
本发明属于天然产物化学研究领域,涉及天然产物提取、分离和鉴定方法,特别涉及一种疯草中苦马豆素的提纯工艺。
二、背景技术
疯草(locoweed)是豆科棘豆属(Oxytopis)和黄芪属(Astragalus)有毒植物的总称,是世界范围内危害草原畜牧业最严重的毒草。在俄罗斯、加拿大、摩洛哥、澳大利亚、墨西哥、西班牙、巴西、埃及、冰岛等国家均有分布。在我国,疯草类植物有44种,主要分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海、新疆、西藏、陕西、四川等省区,分布面积超过400万公顷,每年因疯草中毒所造成的经济损失就高达12亿元以上。因此,在世界范围内,有关疯草及疯草病的研究已成为众多学者的研究热点。国外,关于疯草有毒成分的研究已有80多年历史,突破性进展始于澳大利亚学者Colegate1979年用a-甘露糖甙酶作为工具酶首次从灰苦马豆中分离出吲哚兹定生物碱—苦马豆素。这是人类首次得到苦马豆素(swainsonine),并将其正式命名。1982年美国学者Molyneux从斑荚黄芪和绢毛棘豆中分离鉴定出苦马豆素和氧化氮苦马豆素(swainsonine N-oxide),并确定了疯草的有毒成分就是苦马豆素。
国内对疯草有毒成分的研究起步较晚。20世纪80年代初期,国内学者主要进行了草地疯草种类、种群地理分布的资源调查。80年代中期开始了疯草有毒成分的分离研究,1989年曹光荣等首次从我国黄花棘豆中分离鉴定出苦马豆素,并证明是其主要有毒成分。在随后的十几年间,主要是曹光荣课题组及其培养的博士、硕士研究生围绕我国甘肃棘豆、黄花棘豆、茎直黄芪、宽苞棘豆变异黄芪等疯草系统地开展了研究工作,相继取得了一些突破性进展,主要有:从多种疯草类植物中分离并鉴定出苦马豆素;多种疯草类植物中苦马豆素的定量分析;改进了苦马豆素的提取工艺及其参数;此项研究成果,在1996年获得农业部科技进步三等奖。
国外分离提纯苦马豆素的主要技术工艺是先将植物样品在有机溶剂中浸提,再将浸提物过阳离子交换柱和琼脂糖凝胶柱,最后重结晶获得苦马豆素。其不足是提取率低,不能批量生产。国内在苦马豆素提纯的主要技术工艺方面尚属空缺。
三、发明内容
针对上述现有技术中存在的缺陷和不足,本发明的目的在于,提供一种疯草中苦马豆素的提纯工艺,本提纯工艺采用阳离子交换柱层析、硅胶柱层析,分段升华等技术,最后获得苦马豆素,这样可使苦马豆素的提取率增加,产品纯度提高。增强市场的竟争力,促进苦马豆素作为抗肿瘤药物及免疫增强剂等开发的产业化。
为了实现上述目的,本发明所采用的技术方案是,疯草中苦马豆素的提纯工艺,其特点是,根据苦马豆素的基本理化特性,首先采用阳离子交换法提取出大极性生物碱粗品,再用碱性氯仿抽提,抽提部分经硅胶柱层析分离得到苦马豆素粗品,最后分步升华获得苦马豆素纯品。
本发明的具体提纯工艺分以下五个阶段完成:
第一步,浸膏提取阶段:用工业甲醇从疯草类植物中提取出有机成分总浸膏。
第二步,粗生物碱提取阶段:采用阳离子交换法提取出粗生物碱。
第三步,苦马豆素粗品提取阶段:采用溶剂抽提法提取出苦马豆素粗品。
第四步,苦马豆素提取阶段:采用硅胶柱层析提取出苦马豆素。
第五步,苦马豆素纯化阶段:采用分步升华法提取出苦马豆素纯品。
本发明的提纯工艺提取成本低,产品纯度高,且苦马豆素提取率明显优于国外技术。
四、附图说明
图1是本发明的苦马豆素提纯工艺流程图;
图2是本发明的苦马豆素光谱数据曲线图;光谱数据:UVλmax:289
(log4.67),249(log3.83);
图3是本发明的苦马豆素IR光谱图;光谱数据:IRmax(KBr)cm-1:3431,3370(-OH),2946,2806(CH),2806~2725(Bohlman band),1074(C-O)等吸收峰;
图4是苦马豆素MS光谱图;光谱数据:EIMSm/e:173(M+),155(M-H2O),138(M-H2O-OH),116,115,96,84,72,43(母核裂解碎片峰)。
五、具体实施方式
为了更清楚的理解本发明,以下结合附图和实施例对本发明作进一步的详细说明。
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