[发明专利]液－固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法

权利要求书

1、一种液-固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法，包括如下步骤：

(1)、在具塞比色管中，加入无机盐，pH控制在3.0～9.0，加入成相聚合物溶液和聚乙二醇(PEG)8000或聚乙二醇(PEG)6000修饰物溶液，然后加入血样，用二次水定容，置于康氏电动震荡机上，平置振荡2-10分钟，取下倒置10-20分钟，体系分成聚合物固相和盐水液相，血红蛋白被萃入固相；

(2)、在上述固相加二次水溶解后，加入乙二胺四乙酸和无机盐，置于康氏电动震荡机上，平置振荡2-10分钟，取下倒置10-20分钟，体系分成聚合物固相和盐水液相，血红蛋白被反萃入液相；

(3)、将上述萃入液相的血红蛋白置于透析袋中进行透析，小分子的盐、少量聚合物可以通过透析袋，而留在透析袋中血红蛋白大分子，其纯度可达到99％以上。

2、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述成相聚合物为吐温类、聚乙烯吡咯啉酮、聚乙二醇、聚氧乙烯十二烷基醚、曲通X-100或明胶。

3、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述无机盐为硫酸铵、磷酸钾、柠檬酸钠、磷酸钠或碳酸钾。

4、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述液-固萃取体系中无机盐的浓度为0.5-3.0mol·L^-1。

5、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述液-固萃取体系中成相聚合物的浓度为3～20％。

6、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述液-固萃取体系中修饰物溶液的浓度为0.2～2.0 g·mL^-1。

7、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于所述液-固萃取体系中乙二胺四乙酸的浓度为0.5×10^-3-2.0×10^-3mol·L^-1。

8、根据权利要求1所述分离纯化血红蛋白的方法，其特征在于将具塞比色管置于康氏电动震荡机上，平置振荡4-6分钟，取下倒置12-16分钟。