[其他]生物表面活性剂的制备方法

权利要求书

1、一种利用节杆菌（Arthrobacter simplex）通过代谢调节制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于该方法由下述步骤组成：

A.在含有0.1-0.5%玉米浆、蛋白胨、牛肉汁或酵母膏的有机营养源，5-15%的正烷烃、馏份油、原油、植物油或糖类的碳源，作为氮源的铵盐或硝酸盐，以及含有ZnSO₄·7H₂O0.001-0.005克/升，MnSO₄·2H₂O0.01-0.05克/升，CaCl₂·2H₂O0.01-0.05克/升，和通常含有的Mg⁺⁺，Fe⁺⁺，Na⁺，K⁺离子，其余为水的培养液中培养节杆菌，培养液的碳氮比例控制为30-40∶1，pH用酸或碱调至4-8，培养在20-40℃下进行，并通入0.5-1.5（体积比）分的空气或富养空气，在发酵进行中用KOH或NaOH调节pH为4-8，发酵时间为30-96小时，

B.用1-3.5倍量的甲醇∶氯仿或二氯甲烷为1.5-3∶1（体积比）的溶剂或乙酸乙酯提取培养液，粗提液经蒸干或经硅胶柱层析即得到所需的糖酯。

2、一种利用节杆菌（Arthrobacter simplex）通过休止细胞法制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于该方法由下述步骤组成：

A.在含有0.1-0.5%玉米浆、蛋白胨、牛肉汁或酵母膏的有机营养源，5-15%的正烷烃、馏份油、原油、植物油或糖类的碳源，作为氮源的铵盐或硝酸盐，以及含有ZnSO₄·7H₂O0.001-0.005克/升，MnSO₄·2H₂O0.01-0.05克/升，CaCl₂·2H₂O0.01-0.05克/升，和通常含有的Mg⁺⁺，Fe⁺⁺，Na⁺，K⁺离子，其余为水的培养液中培养节杆菌，培养液的碳氮比例控制为30-40∶1，pH用酸或碱调至4-8，培养在20-40℃下进行，并通入0.5-1.5（体积比）分的空气或富养空气，在培养条件下取出节杆菌，

B.节杆菌作为休止细胞悬浮于磷酸缓冲溶液、生理盐水、蒸馏水或自来水中，以糖类、正烷烃、馏份油、植物油或醋酸盐作碳源，在20-40℃进行培养，所述的磷酸液浓度为0.1-0.5M，pH为4-7。

C.用1-3.5倍量的甲醇、氯仿或二氯甲烷为1.5-3∶1或乙酸乙酯提取，粗提液经蒸干或经硅胶柱层析即得到所需的糖脂。

3、如权利要求2所述的一种利用节杆菌通过休止细胞法制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于该方法是将A所述的培养条件下取出的节杆菌作为休止细胞，置于地下油层，在15-40℃通空气，pH控制在4-8。

4、如权利要求1，2或3所述的一种利用节杆菌制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于所述的培养温度以25-30℃为佳。

5、如权利要求1、2或3所述的一种利用节杆菌制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于所述的有机营养源是酵母膏。

6、如权利要求2所述的一种利用节杆菌通过休止细胞法制备表面活性剂海藻糖脂类化合物的方法，其特征在于所述的碳源是废糖蜜或葡萄糖。