[发明专利]在宿主细胞中表达基因的黑曲霉启动子

权利要求书

1.分离的启动子，其由选自下列的DNA序列组成：

(i)SEQ ID NO：1；

(ii)(i)的子序列，其包含SEQ ID NO：2的序列并保持启动子活性；和

(iii)核酸序列，其在中度严格条件下与SEQ ID NO：1杂交，且包含 SEQ ID NO：2的序列。

2.权利要求1所述的启动子，其中所述启动子是SEQ ID NO：1或其 包含SEQ ID NO：2的序列且保持启动子活性的子序列。

3.权利要求1所述的启动子，其中所述启动子是SEQ ID NO：2的核 酸序列；或者在中度严格条件下与SEQ ID NO：2杂交的核酸序列。

4.权利要求3所述的启动子，其中所述启动子是SEQ ID NO：2。

5.权利要求1所述的启动子，其中所述启动子是在高严格条件下或在 极高严格条件下与SEQ ID NO：1杂交的核酸序列。

6.权利要求3所述的启动子，其中所述启动子是在高严格条件下或在 极高严格条件下与SEQ ID NO：2杂交的核酸序列。

7.变异启动子，其为由这样的核酸序列组成的启动子，该核酸序列在 母启动子的一个或两个或三个或四个核苷酸上进行取代、缺失或插入，其 中所述母启动子由SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的序列组成，其中所述 变异启动子具有启动子活性。

8.杂合启动子，其由两个或更多个启动子组成，其中一个或更多个启 动子为根据权利要求1-7之任一项的启动子，其中每一启动子都有助于所 述杂合启动子的启动子活性。

9.串联启动子，其由一种或更多种核酸序列的一个或更多个拷贝组 成，其中至少一种所述核酸序列为根据权利要求1-7之任一项的启动子的 核酸序列。

10.载体，包括权利要求1所述启动子。

11.载体，包括权利要求3所述启动子。

12.载体，包括权利要求7所述启动子。

13.在微生物宿主细胞中促进目标编码序列的表达的方法，包括，

a)提供DNA构建物，其包括权利要求1-7之任一项的启动子，所述 启动子可操作性连接至目标编码序列，和

b)用所述DNA构建物转化微生物宿主细胞，以使所述目标编码序列 表达。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述启动子是SEQ ID NO：1。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述启动子是SEQ ID NO：2 或在高度严格条件下或在极高严格条件下与SEQ ID NO：2杂交的核酸序 列。

16.根据权利要求13所述的方法，其中所述微生物宿主细胞是细菌或 真菌细胞。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述细菌细胞是芽孢杆菌属 (Bacillus)细胞。

18.根据权利要求16所述的方法，其中所述细菌宿主细胞是链霉属 (Streptomyces)细胞。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述启动子是SEQ ID NO：2。

20.根据权利要求13所述的方法，其中所述目标编码序列是编码酶、 激素、抗体或其部分、选择标记、或受体的序列。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述目标编码序列是编码酶的 序列。

22.根据权利要求20所述的方法，其中所述目标编码序列是编码酶的 序列。