[发明专利]用于治疗细菌感染的表达载体

权利要求书

1.用于分泌多肽的表达载体，其包含启动子、有效结合所述多肽的信号序列、编码突变的大肠杆菌素V的DNA序列，和终止子。

2.权利要求1的表达载体，其中所述突变的大肠杆菌素V包含Seq I.D.No.1。

3.权利要求1的表达载体，其中所述突变的大肠杆菌素V包含Seq I.D.No.3。

4.权利要求1的表达载体，其还包含编码免疫性基因的核苷酸序列。

5.权利要求4的表达载体，其中所述免疫性基因是细菌素免疫性基因。

6.权利要求5的表达载体，其中细菌素免疫性基因是选自camobacteriocin A和brochocin-C的一种或多种免疫性基因。

7.权利要求1的表达载体，其编码对应于Seq.I.D.No.2的氨基酸序列。

8.权利要求1的表达载体，其编码对应于Seq.I.D.No.4的氨基酸序列。

9.权利要求1的表达载体，其中所述启动子选自由P32和P15组成的组。

10.权利要求9的表达载体，所述启动子包含P15核苷酸序列。

11.权利要求1的表达载体，其中所述载体不包括功能抗生素抗性基因。

12.权利要求1的表达载体，其中所述信号肽是divergicin A。

13.产生大肠杆菌素VM的方法，其包括在合适的宿主中导入表达载体，其中所述表达载体包含编码大肠杆菌素VM的核苷酸序列，并且其中所述宿主是乳酸细菌；和从所述宿主分泌所述大肠杆菌素VM。

14.突变的大肠杆菌素V细菌素，其包含对应于Seq I.D.No.1的核苷酸序列编码的蛋白质。

15.权利要求14的突变的大肠杆菌素V细菌素，其中所述蛋白质由对应于Seq I.D.No.3的核苷酸序列编码。

16.组合物，其包含权利要求1的表达载体。

17.乳酸细菌，其包含权利要求1的表达载体。

18.治疗大肠杆菌疾病或者状况的方法，其包括施用有效量的乳酸细菌宿主，该宿主中具有分泌大肠杆菌素VM的表达载体；将所述大肠杆菌与所述乳酸细菌接触；和允许所述大肠杆菌素VM针对所述大肠杆菌作用。

19.抑制革兰氏阴性细菌的方法，其包括将革兰氏阴性细菌与革兰氏阳性细菌接触，其中所述革兰氏阳性细菌分泌有效针对所述革兰氏阴性细菌的抗细菌物质。

20.权利要求19的方法，其中革兰氏阴性细菌是大肠杆菌。

21.权利要求19的方法，其中革兰氏阳性细菌是乳酸细菌。

22.权利要求19的方法，其中所述抗细菌物质是肽或蛋白质。

23.权利要求22的方法，其中所述蛋白质是细菌素。

24.权利要求23的方法，其中所述细菌素选自大肠杆菌素V、大肠杆菌素VM和其组合。

25.用于通过革兰氏阳性宿主分泌有效抗革兰氏阴性细菌的多肽的表达载体，其包含有效抗革兰氏阴性细菌的至少一种预先选择的多肽的核苷酸序列；有效结合所述核苷酸序列的启动子；有效结合所述核苷酸序列并且在所述革兰氏阳性宿主中有效的信号肽；包含对应于细菌素免疫性基因的核苷酸序列的选择标记；和合适的复制子。

26.治疗猪中肠毒性大肠杆菌的方法，其包括施用有效量的乳酸细菌，所述细菌包含产生大肠杆菌素VM的表达载体。

27.权利要求26的方法，其中所述表达载体是饲料级载体。

28.权利要求27的方法，其中所述饲料级载体包含细菌素免疫性基因。

29.权利要求24的方法，其中所述表达载体包含适于在革兰氏阳性宿主中表达革兰氏阴性细菌素的信号肽。

30.权利要求27的方法，其中所述信号肽是col V。