[发明专利]非活性型Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα敲入动物以及同样的敲入细胞无效
申请号: | 200580010479.6 | 申请日: | 2005-03-24 |
公开(公告)号: | CN101098961A | 公开(公告)日: | 2008-01-02 |
发明(设计)人: | 山肩叶子;柳川右千夫 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人科学技术振兴机构 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;A01K67/027;C12N5/00 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所 | 代理人: | 刘新宇 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 活性 ca sup 蛋白 依赖性 蛋白激酶 ii 动物 以及 同样 细胞 | ||
1.一种使用基因打靶法制作非活性型Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα敲入小鼠,即非活性型CaMK IIα敲入小鼠的方法,其特征在于,包括以下步骤:
通过将同源染色体的一方或双方的CaMK IIα基因置换为非活性型、使得表达非活性型CaMK IIα,其中,CaMK IIα的催化结构域中的与ATP结合所必需的Lys-42被置换为精氨酸,
由此,CaMK IIα的蛋白激酶活性被特异地损伤,并保持CaMK IIα的钙调蛋白结合能力和亚基之间的多聚体形成能力。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述非活性型CaMK IIα敲入小鼠在脑内伏核的神经活动与野生型相比相对降低。
3.一种非活性型Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα敲入小鼠神经细胞,即非活性型CaMK IIα敲入小鼠神经细胞,其特征在于,通过将同源染色体的一方或双方的CaMK IIα基因置换为非活性型,使得表达非活性型CaMK IIα,其中,CaMK IIα的催化结构域中的与ATP结合所必需的Lys-42被置换为精氨酸,
由此,CaMK IIα的蛋白激酶活性被特异地损伤,并保持CaMK IIα的钙调蛋白结合能力和亚基之间的多聚体形成能力。
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