[发明专利]调节细胞内和/或细胞外氧化/还原反应的组合物在精子染色或分选方法中的用途有效
申请号: | 200580017377.7 | 申请日: | 2005-03-29 |
公开(公告)号: | CN101238369A | 公开(公告)日: | 2008-08-06 |
发明(设计)人: | C·L·路德维格;J·A·格雷厄姆;K·S·克劳利;M·安扎尔 | 申请(专利权)人: | 英格朗公司 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50;C12N5/06 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 美国德*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 调节 细胞内 细胞 氧化 还原 反应 组合 精子 染色 分选 方法 中的 用途 | ||
1. 包含活精子、调节细胞内和/或细胞外氧化/还原反应的组合物、以及DNA选择性染料的染色混合物,所述染色混合物中组合物为丙酮酸盐时其浓度大于50μM。
2. 权利要求1的染色混合物,其中的组合物从由丙酮酸盐、维生素K、硫辛酸、谷胱甘肽、黄素、醌类、超氧化物歧化酶、超氧化物歧化酶模拟物及其任意组合组成的组中选择。
3. 权利要求2的染色混合物,其中的组合物从由丙酮酸盐、维生素K、硫辛酸以及它们的组合组成的组中选择。
4. 权利要求1的染色混合物,其中组合物含有选自约2.5mM、约10mM、约15mM、约25mM以及约50mM浓度的丙酮酸盐。
5. 权利要求1的染色混合物,其中组合物含有选自约10μM、约50μM、约75μM以及约100μM浓度的维生素K。
6. 权利要求1的染色混合物,其中组合物含有选自约0.1mM、约0.5mM、约0.75mM、约1.0mM以及约1.5mM浓度的硫辛酸。
7. 权利要求1的染色混合物,其中DNA选择性染料为DNA选择性荧光染料。
8. 权利要求2的染色混合物,其中DNA选择性染料为DNA选择性荧光染料。
9. 权利要求1的染色混合物,其中DNA选择性染料为UV激发或可见光激发的染料。
10. 权利要求2的染色混合物,其中DNA选择性染料为UV激发或可见光激发的染料。
11. 权利要求1的染色混合物,其中染料从由Hoechst 33342、Hoechst33258、SYBR-14、以及双苯甲亚胺-BODIPY缀合物6-{[3-((2Z)-2-{[1-(二氟硼烷基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基]亚甲基}-2H-吡咯-5-基)丙酰基]氨基}-N-[3-(甲基{3-[({4-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H,3’H-2,5’-双苯并咪唑-2’-基]苯氧基}乙酰基)氨基]丙基}氨基)丙基]己酰胺组成的组中选择。
12. 权利要求2的染色混合物,其中染料从由Hoechst 33342、Hoechst33258、SYBR-14、以及双苯甲亚胺-BODIPY缀合物6-{[3-((2Z)-2-{[1-(二氟硼烷基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基]亚甲基}-2H-吡咯-5-基)丙酰基]氨基}-N-[3-(甲基{3-[({4-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H,3’H-2,5’-双苯并咪唑-2’-基]苯氧基}乙酰基)氨基]丙基}氨基)丙基]己酰胺组成的组中选择。
13. 染色精子细胞的方法,所述方法包括形成这样的染色混合物,其含有完整活精子、调节细胞内和/或细胞外氧化/还原反应的组合物、以及DNA选择性染料,所述染色混合物中组合物为丙酮酸盐时其浓度大于50μM。
14. 权利要求13的方法,其中DNA选择性染料从由Hoechst 33342、Hoechst 33258、SYBR-14、以及双苯甲亚胺-BODIPY缀合物6-{[3-((2Z)-2-{[1-(二氟硼烷基)-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基]亚甲基}-2H-吡咯-5-基)丙酰基]氨基}-N-[3-(甲基{3-[({4-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H,3’H-2,5’-双苯并咪唑-2’-基]苯氧基}乙酰基)氨基]丙基}氨基)丙基]己酰胺组成的组中选择。
15. 权利要求13的方法,其中将染色混合物置于约4℃至约30℃的温度。
16. 权利要求14的方法,其中将染色混合物置于约30℃至约39℃的温度。
17. 权利要求14的方法,其中将染色混合物置于约40℃至约50℃的温度。
18. 权利要求13的方法,其中的组合物中含有选自约2.5mM、约10mM、约15mM、约25mM以及约50mM浓度的丙酮酸盐。
19. 权利要求13的方法,其中组合物含有选自约10μM、约50μM、约75μM以及约100μM浓度的维生素K。
20. 权利要求13的方法,其中组合物含有选自约0.1mM、约0.5mM、约0.75mM、约1.0mM以及约1.5mM浓度的硫辛酸。
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