[发明专利]蛋白质分离的方法无效
申请号: | 200580026695.X | 申请日: | 2005-06-06 |
公开(公告)号: | CN101111511A | 公开(公告)日: | 2008-01-23 |
发明(设计)人: | A·利赫姆 | 申请(专利权)人: | AVT血浆有限公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/22;C07K14/81;C07K14/745;C07K14/755;C07K14/765;C07K16/00;B01D15/08 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张广育;姜建成 |
地址: | 澳大利亚*** | 国省代码: | 澳大利亚;AU |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 分离 方法 | ||
1.一种从含有蛋白质的溶液中分离所述蛋白质的方法,所述溶液选自:粗制血浆、血清、来源于血浆的冷上清液、分级分离的人血浆、来源于血浆的冷沉淀物和重组肉汤,所述方法包括:
(i)提供具有下式的固体分离介质:
M-S-L
其中M为基质骨架,S为任选的间隔臂,L是配体巯基烟酸;
(ii)将所述固体分离介质与所述溶液相接触,这样至少一种所述蛋白质可逆地结合到所述固体分离介质上;
(iii)进行至少一步洗脱以从该固体分离介质上选择性洗脱至少一种蛋白质流分。
2.根据权利要求1的方法,其中该溶液为粗制血浆。
3.根据权利要求1或权利要求2的方法,其中M为高密度树脂。
4.根据权利要求1至3任一项的方法,其中L为2-巯基烟酸。
5.根据权利要求1至4任一项的方法,其中S为包含环氧基的化合物。
6.根据权利要求1至5任一项的方法,其中该至少一种蛋白质流分包含选自下列的至少一种蛋白质:免疫球蛋白例如IgG、IgA、IgM、IgD或IgE,转铁蛋白,血纤蛋白原或其衍生物,血浆蛋白酶抑制剂例如抗凝血酶如抗凝血酶III,血液促凝固蛋白,血液抗凝固蛋白,细胞因子,生长因子,白蛋白或其衍生物,溶血栓剂,抗血管发生蛋白,胰岛素或其衍生物,α-1-蛋白酶抑制剂或其衍生物例如α-1-抗胰蛋白酶,α-2-抗纤溶酶或其衍生物,C-1酯酶抑制剂,载脂蛋白,HDL,纤连蛋白或其衍生物,β-2-糖蛋白I,纤溶酶原,纤溶酶,纤溶酶原激活物,纤溶酶原抑制剂,尿激酶或其衍生物,链激酶或其衍生物,间-α-胰蛋白酶抑制剂,α-2-巨球蛋白,淀粉状蛋白,血清类黏蛋白,铁蛋白,前白蛋白,GC-球蛋白,血凝乳酶和补体C3。
7.根据权利要求6的方法,其中该至少一种蛋白质流分包含至少一种选择下列的蛋白质:免疫球蛋白、转铁蛋白、血纤蛋白原或其衍生物、α-1-蛋白酶抑制剂和白蛋白,或其衍生物。
8.根据权利要求1至7任一项的方法,其中含有所述蛋白质的该溶液具有介于约3.0至约6.0之间的pH。
9.根据权利要求8的方法,其中含有所述蛋白质的该溶液具有介于约4.5至约6.0之间的pH。
10.根据权利要求1至9任一项的方法,其中第一步洗脱包括用pH介于约4至约8之间、离子强度介于约0.00005S/cm至约0.1S/cm之间的溶液洗脱该固体分离介质以洗脱第一蛋白质流分。
11.根据权利要求10的方法,其中该第一蛋白质流分包含至少一种选自α-1-蛋白酶抑制剂、白蛋白、血清类黏蛋白和前白蛋白的蛋白质。
12.根据权利要求10或权利要求11的方法,其中第二步洗脱包括用pH介于约5至约7之间、离子强度介于约0.0001S/cm至约0.1S/cm之间的溶液洗脱该固体分离介质以洗脱第二蛋白质流分。
13.根据权利要求12的方法,其中该溶液还包含芳香族、非芳香族或杂芳族疏水化合物。
14.根据权利要求13的方法,其中该非芳香族疏水化合物为烷基羧酸盐、磺酸盐或带负电的洗涤剂。
15.根据权利要求12至14任一项的方法,其中该第二蛋白质流分包含至少一种选自白蛋白和免疫球蛋白的蛋白质。
16.根据权利要求12至15任一项的方法,其中第三步洗脱包括用pH介于约5至约9之间、离子强度介于约0.001S/cm至约4S/cm之间的溶液洗脱该固体分离介质以洗脱第三蛋白质流分。
17.根据权利要求16的方法,其中该第三蛋白质流分包含至少一种选自免疫球蛋白、转铁蛋白和血纤蛋白原的蛋白质。
18.根据权利要求16或权利要求17的方法,其中第四步洗脱包括用pH介于约5至约9之间、离子强度介于约0.01S/cm至约2S/cm之间的溶液洗脱该固体分离介质以洗脱第四蛋白质流分。
19.根据权利要求18的方法,其中该溶液还包括无机酸盐。
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