[发明专利]放射性氟化肽

说明书

本发明涉及新的肽基化合物和它们在使用正电子发射断层显像(PET)用于诊断成像中的用途。更具体地，本发明涉及这样的肽基化合物作为与和血管生成相关的受体结合的靶向载体的用途，特别是整联蛋白受体，例如αvβ3整联蛋白受体。因此这样的化合物可以用于诊断或治疗例如恶性疾病、心脏病、子宫内膜异位症、与炎症相关的疾病、类风湿性关节炎和卡波济氏肉瘤(kaposi’s sarcoma)。此外，它还涉及制备该肽基化合物的方法和试剂。

本申请用于诊断成像的放射性标记生物活性肽在核医学上获得重要地位。与特定细胞类型选择性相互使用的生物学活性分子可以用于对目标组织释放放射活性。例如放射性标记的肽对向肿瘤、梗塞和感染组织释放放射性核素以用于诊断成像和放射治疗具有重要的潜力。18F具有半衰期大约为110分钟，是许多受体成像研究的正电子-放射核素的选择。因此，因为在PET定量测定和表征多种疾病中的应用，18F-标记生物活性肽具有很大的临床潜力。

新血管可以通过两种不同的机理形成：血管发生(vasculogenesis)或血管生成(angiogenesis)。血管生成是从存在的血管分支形成新血管。这种过程的主要刺激可能是对组织中的细胞的不充分的营养和氧(氧不足)的供应。细胞可以通过分泌多种的血管发生因子响应；常常提到的一个例子是血管内皮细胞生长因子(VEGF)。这些因子引起蛋白水解酶的分泌，蛋白水解酶裂解基膜蛋白质，以及限制这些可能有害酶的作用的抑制剂。血管发生因子的其他突出的作用是引起内皮细胞位移和分裂。与基膜附着的内皮细胞，围绕血管在contralumenal侧上形成连续片状，该内皮细胞没有经历有丝分裂。附着损失和来自血管生成因子受体的信号的联合作用引起内皮细胞内皮细胞移动、繁殖和自身重排，最终在新血管周围合成基膜。

血管生成在组织生长和重塑中是突出的，包括伤口愈合和炎症过程。当肿瘤达到毫米大小时为了保持它们的生长速度，必须开始血管生成。血管生成伴随内皮细胞和它们的环境的特征性变化。除了在影响和控制蛋白质水解中涉及的各种蛋白质之外，在准备移动中这些细胞的表面被重塑，基膜被降解的地方隐蔽结构被暴露。在肿瘤的情况下，得到的血管网通常被打乱，形成明显的纽结还有动静脉的分路。对血管生成的抑制作用也被认为是抗肿瘤治疗有希望的策略。伴随血管生成的转化作用对于诊断也是非常有希望的，一个明显的例子是恶性疾病，但是这个概念还指出对炎症和各种炎症相关的疾病非常有前途，包括动脉粥样硬化、早期动脉粥样硬化损伤的巨噬细胞可能是血管生成因子的潜在根源。

细胞粘着中涉及的很多配体包含三肽序列精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)。该RGD序列表现出作为代表该序列的配体与细胞表面上的受体之间的主要识别位点而起作用。普遍认为配体和受体之间的二级相互作用提高相互作用的特异性。这些二级作用可能发生在配体和紧邻RGD序列的受体之间的部分或者发生在远离RGD序列的位点。

因此与体内血管发生相关的整联蛋白受体的有效靶向和成像要求化学稳健和稳定的选择性、高亲和性RGD为基础的载体。此外，当为了减少与背景有关的问题而设计显像剂时，排泄途径是重要的因素。

WO 03/006491描述了目标为与血管生成相关的整联蛋白受体的肽基化合物。然而，存在对另外的可用于诊断成像技术如PET的肽基化合物的需要。共同待决的国际申请PCT/GB2004/001052描述了适用于标记具有18F的生物学活性载体的方法。但这里还需要肽基化合物，其可以迅速地和有效地制备，并且还具有理想的生物活性。

在第一方面，本发明提供了一种放射性氟化方法，其包含式(I)化合物的反应：

其中载体包含片段：

和式(II)的化合物：

其中：

n是0-20的整数；

m是0-10的整数；

Y是H、C_1-6烷基(如甲基)，或苯基

得到式(III)化合物：

其中m、n和Y如式(II)化合物中所定义，载体如对式(I)化合物中所定义。

这个反应可以在合适溶剂，例如在pH范围为1-11，合适的为2-11，更合适的为2-6的含水缓冲液中，并在非端点温度5-100℃，合适的为20-70℃，优选环境温度下进行。

在一个具体方面，式(I)或(III)中的载体为式(A)：

其中X⁷为-NH₂或

其中a是1-10的整数，优选a是1。