[发明专利]通过rh核心蛋白聚糖－Fc融合蛋白抑制纤维发生的方法

说明书

发明领域

本发明涉及通过施用肝星形细胞活化和成纤维细胞活化的拮抗剂来抑制纤 维发生(尤其是肝纤维发生)的方法。本发明还涉及制备融合蛋白构建体和生 产融合蛋白。

发明背景

关于肝纤维化，纤维化在结构改造的最终共有途径中起着整体性的作用， 所述结构改造减少了损伤后的正常器官功能。它是针对发育或炎症疾病的最具 根本破坏性和最不需要的应答中的一种，而且在暴露于高氧压后的数百万的处 于许多不同疾病进程的晚期阶段的个体中被观察到，所述疾病包括诸如囊性纤 维化、间质性肾炎、肝硬化和肺纤维化。肝纤维化的特征在于肝中的细胞外基 质组分的过量沉积。如S.L.Friedman在题为“Molecular Regulation of Hepatic Fibrosis，an Integrated Cellular Response to Tissue Injury，”J Biol Chem 2000； 275：2247-2250的文章中所述，有几种肝细胞类型参与基质沉积，主要类型是 如B.Tuchweber等在题为“Proliferation and Phenotypic Modulation of Portal Fibroblasts in the Early Stages of Cholestatic Fibrosis in the Rat，”Lab Invest 1996； 74：265-278的文章所述的肝星形细胞(HSC)和门成纤维细胞。在过去的10年 间，已有大量注意力关注于造成肝中的纤维发生细胞活化的刺激物。如以上 Friedman之文章说述，主要焦点是在生长因子和氧化剂应激上。

纤维发生经典地是由器官成纤维细胞介导的，所述细胞表达足量的I和III 型胶原蛋白。肝中纤维发生的表达已是以前几年详尽研究的主题。该过程的细 胞因子调节是复杂的。一般认为I和III型胶原蛋白是主要的纤维变性胶原蛋白， 而且它们由肝星形细胞(HSC)和成纤维细胞良好地表达。这些胶原蛋白的表达 由细胞因子复合物调节。例如，肿瘤坏死因子β1(TGFβ1)在刺激过程中是早期 而且关键的组分。一般认为，在肺、肝和肾中TGFβ1是针对这些胶原蛋白基 因的调节分子。(Wahl，S.M.，1992 J.Clin.Immunol.12：61-74；Sharma，K.和 Ziyadeh，F N.，1993 Seminars in Nephrology 13：116-128；Roberts等，1986 Proc. Nat′l Acad.Sci.USA 83：4167-4171。)

最重要的肝纤维化硬化的成因是慢性乙型和丙型肝炎的感染和长期酗酒。 肝硬化是肝纤维化的临床终点。直到目前，没有可用的回复肝硬化的有效方法， 而那些受到威胁到生命的肝功能损伤的人只能指望肝移植来抢救。可是，每年 新硬化病例的数目为可用于移植的肝的数目5至10倍。所以，防止纤维发生 和早期治疗纤维化是硬化的最佳疗法(Achord JL.1991，Compr Ther.17：57- 64，Habib等，2001，Postgrad Med.109：101-13)。抑制纤维发生的策略可 以分成如下几组：(a)抗炎剂和抗氧化剂；(b)细胞因子或细胞因子受体的拮 抗剂；(c)星形细胞活化的抑制剂；和(d)抗胶原蛋白剂(D.Montgomery Bissell， 2001，EXPERIMENTAL and MOLECULAR MEDICINE，Vol.33：179-190)。 可是，这些试剂中的大部分在治疗纤维化中并不是很有效或者有严重的副作 用。

因此需要开发新的用于抑制肝纤维发生和治疗肝纤维化的方法。