[发明专利]作为有效的siRNA载体的高分支HK肽无效
申请号: | 200580039448.3 | 申请日: | 2005-11-17 |
公开(公告)号: | CN101060849A | 公开(公告)日: | 2007-10-24 |
发明(设计)人: | 阿奇博尔德·米克森 | 申请(专利权)人: | 巴尔的摩马里兰大学 |
主分类号: | A61K31/70 | 分类号: | A61K31/70 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 | 代理人: | 陶贻丰;郑霞 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 作为 有效 sirna 载体 分支 hk | ||
1、一种使用siRNA转染细胞的方法,其包括
将转染复合物与一种或多种细胞相接触;
其中所述转染复合物包括转运聚合物和siRNA,且
其中所述转运聚合物包括组氨酸和赖氨酸。
2、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括6-10个末端分支。
3、权利要求2所述的方法,其中所述转运聚合物包括至少一种具有序列-HHHKHHHKHHHKHHHHKHHH-或其亚片段的末端分支。
4、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括至少一种稳定剂。
5、权利要求1所述的方法,其中所述稳定剂包括PEG。
6、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括靶向配基。
7、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。
8、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括H3K8b。
9、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括H3K8b(+RGD)。
10、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括(-HHHK)H3K8b。
11、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括(-HHHK)H3K8b(+RGD)。
12、权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种细胞包括一种或多种选自转化细胞系、重组细胞系、恶性细胞系和原代细胞系的细胞。
13、权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种细胞包括一种或多种选自SVR-bag4、MDA-MB-435、C6和HUVEC细胞系的细胞。
14、权利要求1所述的方法,其中所述siRNA靶向Raf-1序列。
15、一种使用siRNA转染细胞的方法,其包括:
将siRNA与包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物混合以形成转染复合物;
使所述转染复合物在约室温下静置约15分钟至约1.5小时;和
将所述转染复合物与一种或多种细胞接触。
16、一种制备转染复合物的方法,其包括
将siRNA与包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物混合;
其中所述转运聚合物包含6-10个末端分支。
17、权利要求16所述的方法,其中所述转运聚合物与所述siRNA的比例是约0.5∶1(wt/wt)至约24∶1(wt/wt)。
18、权利要求16所述的方法,其中所述聚合物包含至少一个具有序列-HHHKHHHKHHHKHHHKHHH-或其亚片段的末端分支。
19、权利要求16所述的方法,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。
20、一种转染复合物,其包括siRNA和包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物;其中所述转运聚合物包含约6至约10个末端分支。
21、权利要求20所述的转染复合物,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。
22、权利要求20所述的转染复合物,其中所述siRNA靶向Raf-1序列。
23、权利要求20所述的转染复合物,其中所述转运聚合物与所述siRNA的比例是约0.5∶1(wt/wt)至约24∶1(wt/wt)。
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