[发明专利]作为有效的siRNA载体的高分支HK肽无效

专利信息
申请号: 200580039448.3 申请日: 2005-11-17
公开(公告)号: CN101060849A 公开(公告)日: 2007-10-24
发明(设计)人: 阿奇博尔德·米克森 申请(专利权)人: 巴尔的摩马里兰大学
主分类号: A61K31/70 分类号: A61K31/70
代理公司: 北京安信方达知识产权代理有限公司 代理人: 陶贻丰;郑霞
地址: 美国马*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 作为 有效 sirna 载体 分支 hk
【权利要求书】:

1、一种使用siRNA转染细胞的方法,其包括

将转染复合物与一种或多种细胞相接触;

其中所述转染复合物包括转运聚合物和siRNA,且

其中所述转运聚合物包括组氨酸和赖氨酸。

2、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括6-10个末端分支。

3、权利要求2所述的方法,其中所述转运聚合物包括至少一种具有序列-HHHKHHHKHHHKHHHHKHHH-或其亚片段的末端分支。

4、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括至少一种稳定剂。

5、权利要求1所述的方法,其中所述稳定剂包括PEG。

6、权利要求1所述的方法,其中所述转运聚合物包括靶向配基。

7、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。

8、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括H3K8b。

9、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括H3K8b(+RGD)。

10、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括(-HHHK)H3K8b。

11、权利要求1所述的方法,其中所述聚合物包括(-HHHK)H3K8b(+RGD)。

12、权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种细胞包括一种或多种选自转化细胞系、重组细胞系、恶性细胞系和原代细胞系的细胞。

13、权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种细胞包括一种或多种选自SVR-bag4、MDA-MB-435、C6和HUVEC细胞系的细胞。

14、权利要求1所述的方法,其中所述siRNA靶向Raf-1序列。

15、一种使用siRNA转染细胞的方法,其包括:

将siRNA与包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物混合以形成转染复合物;

使所述转染复合物在约室温下静置约15分钟至约1.5小时;和

将所述转染复合物与一种或多种细胞接触。

16、一种制备转染复合物的方法,其包括

将siRNA与包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物混合;

其中所述转运聚合物包含6-10个末端分支。

17、权利要求16所述的方法,其中所述转运聚合物与所述siRNA的比例是约0.5∶1(wt/wt)至约24∶1(wt/wt)。

18、权利要求16所述的方法,其中所述聚合物包含至少一个具有序列-HHHKHHHKHHHKHHHKHHH-或其亚片段的末端分支。

19、权利要求16所述的方法,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。

20、一种转染复合物,其包括siRNA和包含组氨酸和赖氨酸的转运聚合物;其中所述转运聚合物包含约6至约10个末端分支。

21、权利要求20所述的转染复合物,其中所述聚合物包括一种或多种选自H3K8b、H3K8b(+RGD)、(-HHHK)H3K8b和(-HHHK)H3K8b(+RGD)的聚合物。

22、权利要求20所述的转染复合物,其中所述siRNA靶向Raf-1序列。

23、权利要求20所述的转染复合物,其中所述转运聚合物与所述siRNA的比例是约0.5∶1(wt/wt)至约24∶1(wt/wt)。

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