[发明专利]作为有效的siRNA载体的高分支HK肽

说明书

政府利益声明

本发明的开发使用来自国家健康研究院的美国政府资金(批准号CA096984)，美国政府具有本发明的某些权利。

相关专利的交叉引用

本发明要求2004年11月17日提交的美国临时专利申请第60/628,341号的利益，其全部内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及使用siRNA通过将转染复合物与一种或多种细胞相接触而转染细胞的方法。本发明还涉及所述转染复合物及其组合物。本发明进一步涉及使用本发明的转染复合物及其组合物治疗患者的方法。

发明背景

小干扰RNA分子(siRNA)的使用是使基因沉默并由此使相应的基因产物沉默的有效新技术。已经报道，RNA干扰(RNAi)比反义RNA独自沉默基因的效率高十倍(Rocheleau CE等人，Wnt signaling and an APC-relatedgene specify endoderm in early C.elegans embryos.Cell 1997；90：707-716.)。siRNA已经用于研究蛋白质在信号传导途径中的作用，并且已经表明这些分子可以用于治疗多种其中致病蛋白过量表达的疾病(Arenz C，SchepersU.，RNA interference：from an ancient mechanism to a state of the arttherapeutic application？Naturwissenschaften 2003；90：345-359.；Coburn GA，Cullen BR.siRNAs：a new wave of RNA-based therapeutics.J AntimicrobChemother 2003；51：753-756.)。为避免由较长双链RNA诱导的非特异性的基因沉默，小干扰RNA(21-23个核苷酸的双链体)，已经被用作调节子来降解靶mRNA(Fire A，Xu S，Montgomery MK，Kostas SA，Driver SE，MelloCC.Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA inCaenorhabditis elegans.Nature 1998；391：806-811.)。siRNA一旦进入细胞，即被掺入RNA诱导的沉默复合物(RISC) ——一种导致RNA双链解旋和链分离的蛋白质-RNA复合物。然后，反义RNA指导活化的RISC来使靶mRNA退火并裂解靶mRNA(Hammond SM，Bernstein E，Beach D，HarmonGJ.An RNA-directed nuclease mediates post-transcriptional gene silencing inDrosophila cells.Nature 2000；404：293-296；Reynolds A，Leake D，Boese Q，Scaringe S，Marshall WS，Khvorova A.Rational siRNA design for RNAinterference.Nat Biotechnol 2004；22：326-330；Hammond SM，Boettcher S，Caudy AA，Kobayashi R，Harmon GJ.Argonaute2，a link between genetic andbiochemical analyses of RNAi.Science 2001；293：1146-1150；Bernstein E，Caudy AA，Hammond SM，Harmon GJ.Role for a bidentate ribonuclease inthe initiation step of RNA interference.Nature 2001；409：363-366.)。