[发明专利]免疫球蛋白的纯化

权利要求书

1.一种由多孔碳水化合物颗粒组成的分离基质，所述颗粒上固定有 抗体结合蛋白配体，其中所述配体密度为5.0-10mg/ml；以及中值粒径 为6 5-84μm。

2.如权利要求1所述的分离基质，其中对于大小为11kDa的葡聚糖， 其表达为K_av的凝胶相分布系数大于0.65。

3.如权利要求1或2所述的分离基质，其中对于大小为11kDa的葡 聚糖，其表达为K_av的凝胶相分布系数为0.65-0.85。

4.如权利要求1或2所述的分离基质，其中所述配体密度为 5.5-9.0mg/ml。

5.如权利要求1或2所述的分离基质，其中所述中值粒径为75μm。

6.如权利要求1或2所述的分离基质，其中所述颗粒包括交联多糖 材料。

7.如权利要求6所述的分离基质，其中所述交联多糖材料为交联琼 脂糖。

8.如权利要求7所述的分离基质，其中所述琼脂糖聚合物在凝胶化 之前已经烯丙基化。

9.如权利要求1或2所述的分离基质，其提供了保留时间为2.4 分钟时大于40mg抗体/ml分离基质的动态结合能力。

10.如权利要求1或2所述的分离基质，其中所述配体包括Fc结合 蛋白。

11.如权利要求10所述的分离基质，其中所述Fc结合蛋白为蛋白 A。

12.如权利要求11所述的分离基质，其中所述Fc结合蛋白为非哺 乳动物来源所产生的重组蛋白A。

13.如权利要求1或2所述的分离基质，其中所述配体包括蛋白A 功能结构域的单体、二聚体或多聚体。

14.如权利要求13所述的分离基质，其中一个或多个所述蛋白A 功能结构域发生突变。

15.一种包括如权利要求1-14任意一项所述的分离基质的色谱柱。

16.一种从原料中大规模捕获抗体的试剂盒，所述试剂盒包括，位 于不同腔室的填充有如权利要求1-14任意一项所述的分离基质的色 谱柱，一个或多个缓冲液和其使用的书面说明书。

17.通过亲和色谱纯化抗体的方法，该工艺包括将工艺原料与如权 利要求1-14任意一项所述的分离基质接触、任选的对吸附至分离基质 上的抗体进行洗涤的步骤、加入将抗体从分离基质上释放出来的洗脱 液、以及从洗脱液中回收抗体。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述工艺原料包括发酵液。

19.如权利要求17或18所述的方法，其中所述原料在与分离基质 接触之前经过机械过滤。

20.如权利要求17或18所述的方法，其中所述抗体为单克隆抗体。

21.如权利要求17或18所述的方法，其中所述分离基质存在于色 谱柱中，所述工艺原料和洗脱液通过所述色谱柱。

22.一种通过亲和色谱从液体纯化一种或多种抗体的方法，该工艺 包括将所述液体与如权利要求1-14任意一项所述的分离基质接触， 以吸收抗体，并回收经纯化的液体。

23.如权利要求21所述的方法，其中通过加入洗脱液将所述抗体从 分离基质中释放出来，从而制备用于再次使用的分离基质。

24.一种对抗体进行纯化的多步骤工艺，该工艺包括如权利要求18 所述的步骤，之后为对抗体进行中间纯化和/或精炼的一个或多个步 骤。

25.如权利要求24所述的工艺，其中所述捕获步骤之后为疏水交互 作用和/或离子交换色谱。

26.如权利要求20所述的工艺，其中所述捕获步骤之后为多种形式 的阴离子或阳离子交换色谱。