[发明专利]提纯大环内酯的方法

说明书

本发明涉及提纯大环内酯类、特别是他克莫司、子囊霉素(ascomycin)、西罗莫司、依维莫司(everolimus)或吡美莫司(pimecrolimus)的方法，通过使用吸附树脂在高于约30摄氏度的洗脱温度分离的方法。

相关申请

本申请要求美国临时申请编号No.60/638,628(2004年12月22日提交)和No.60/638,815(2004年12月23日提交)的权利，上述申请的内容全文引用在此作为参考。

发明背景

大环内酯类是具有一个或多个脱氧糖作为取代基的多元内酯环。红霉素、阿奇霉素和克拉霉素是具有抑菌和/或杀菌活性的大环内酯。

他克莫司(FK 506)也是大环内脂类抗菌素，其还是一种免疫抑制剂。他克莫司比环孢子菌素更有效，据报道其具有对T-淋巴细胞的选择性抑制作用。

吡美莫司是大环内酰胺和子囊霉素衍生物，据报道其抑制T细胞和肥大细胞生成前炎性细胞活素。默克索引1331(Maryadele J.O′Neil等人编辑，第13版，2001年)。据报道吡美莫司用作免疫抑制剂，Id。

据报道西罗莫司，另一种大环内酯，是免疫抑制剂。在移植之后，已经将西罗莫司和环孢子菌素以及皮质类固醇类一起给药以避免移植排斥。Martindale：The Complete Drug Reference 568(Sean C.Sweetman ed.，Pharmaceutical Press 33rd ed.2002).

依维莫司，西罗莫司的衍生物，据报道可在器官移植中用作免疫抑制剂。Martindale，见539。

大环内酯通常通过发酵获得，虽然其中一些的合成路线是已知的。所得到的大环内酯通常含一些杂质，其可通过各种方法检测，例如高压液相色谱分析(HPLC)。在药物化合物中存在杂质是不希望的，在许多管辖区域的卫生管理机构(例如美国的食品与药物管理局)对药物中杂质的可接受水平有确定的基本标准。不言而喻，需要降低任何药物中杂质浓度的方法并且将其工业化应用。

例如，美国专利No.4,894,366、6,576,135、6,881,341和6,492,513公开了他克莫司的提纯过程。需要其它的更经济有效的提纯大环内酯的方法。

发明概述

在一个实施方案中，本发明提供提纯用于大环内酯的层析法。该方法包括提供大环内酯负载，将大环内酯负载加到吸附树脂床上，用洗脱液洗脱，所述洗脱液含有至少一种有机溶剂，所述有机溶剂选自THF、乙腈、正丙醇、异丙醇、乙醇以及和丙酮和水，在大于约30摄氏度至约所述溶剂沸点温度之间的温度洗脱，得到流出物，收集所述流出物的主要部分，然后回收大环内酯。

在另一方面、本发明涉及用上述方法制备的大环内酯，特别是他克莫司、子囊霉素、西罗莫司(雷帕霉素)、依维莫司和吡美莫司。

发明详述

这里使用的术语“减压”指的是压力小于约760mmHg。另外，在这里使用的术语“面积百分比”指的是通过本发明方法得到的HPLC色谱的面积百分比。在这里使用的术语抗溶剂指的是这样的物质，通常在环境温度为液体，大环内酯在其中最好是微溶的。

在这里使用的术语“杂质”涉及与所需的大环内酯相比任何具有不同的停留时间的化合物。不同的停留时间可以例如通过下文描述的HPLC方法测定。

在这里使用的术语RRT0.95和RRT1.25分别涉及子囊霉素和涉及子囊霉素和二氢他克莫司(dihydrotacrolimus)，它们是他克莫司中的杂质，在HPLC分析中，例如下述的分析中，其具有相对保留时间(相对于他克莫司)约0.95和1.25。

这里使用的与混合物或液体组合有关的术语体积百分数或体积百分比(vol-％)指的是根据下式计算的体积分数(用物质A说明)：

Vol-％_A＝Wt_A×ρ_A/(Wt_A×ρ_A+Wt_B×ρ_B)

其中：Wt_A和Wt_B分别是物质A和B的重量，以克计；ρ_A和ρ_B分别是物质A和B的密度，以g/ml计。

通过在大于约30摄氏度至约溶剂(在洗脱液中包括的)沸点温度的温度用层析法将杂质与大环内酯分离，得到了好得多的纯度。