[发明专利]可完全溶解于葡萄酒中的新的甘露糖蛋白及其在对葡萄酒加以稳定的过程中的应用

权利要求书

1.甘露糖蛋白的制备方法，所述方法包括：

a)对酵母细胞的悬浮液进行酶促水解，以使所述酵母细胞降解，并 使甘露糖蛋白和其它酵母组分从已降解的酵母细胞中溶解并释放；

b)回收已溶解的甘露糖蛋白；以及

c)用pH至少为9的碱性溶液处理被回收的甘露糖蛋白。

2.如权利要求1的方法，其中步骤a)中的所述酶促水解通过使所述 酵母细胞的悬浮液自溶来进行。

3.如权利要求1或2的方法，还包括：

d)通过超滤纯化经处理的甘露糖蛋白。

4.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中通过超滤回收步骤b)中 的所述已溶解的甘露糖蛋白。

5.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中，在步骤b)中所述的回 收已溶解的甘露糖蛋白之前，通过固-液分离方法去除不溶性物质。

6.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中步骤c)中的所述处理在 至少10的pH下进行。

7.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中步骤c)中的所述处理在 室温至120℃的温度下进行。

8.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中所述处理的进行时间为1 小时至1星期。

9.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中步骤c)中的所述处理在 下述温度、持续时间和pH条件下进行，所述温度、持续时间和pH条件使 得：与处理前的甘露糖蛋白在相同条件下测定的³¹P-NMR谱相比，步骤 c)中得到的产物的³¹P-NMR表明，在4.5与5.5ppm之间出现由磷酸甘露 糖单酯所产生的一个或更多个峰或所述峰的强度增加，在-1与-2ppm之间 由磷酸甘露糖二酯所产生的一个或更多个峰消失或强度减小，所述测定在 27℃下，在pH为8的D₂O中进行，并使用甘油磷酰胆碱作为内标，其中 甘油磷酰胆碱的化学位移值取为0.43。

10.如权利要求9的方法，其中用碱性溶液进行的所述处理在如下条 件下进行，所述条件使得：在所述³¹P-NMR谱中，在-1与-2ppm之间由磷 酸甘露糖二酯所产生的所述一个或更多个峰的面积与在4.5与5.5ppm之 间由磷酸甘露糖单酯所产生的所述一个或更多个峰的面积之比为0∶100。

11.如权利要求1-2中任何一项的方法，其中步骤c)中的所述处理在 下述温度、持续时间和pH条件下进行，所述温度、持续时间和pH条件使 得：RNA、寡-和多核糖核苷酸杂质的至少50％被降解为单核苷酸。

12.如权利要求6的方法，其中其中步骤c)中的所述处理在10至13 的pH下进行。

13.如权利要求11的方法，其中步骤c)中的所述处理在下述温度、 持续时间和pH条件下进行，所述温度、持续时间和pH条件使得： RNA、寡-和多核糖核苷酸杂质全部被降解为单核苷酸。

14.可由权利要求1-13中任何一项的方法获得的甘露糖蛋白。

15.如权利要求14的甘露糖蛋白，其中所述甘露糖蛋白的³¹P-NMR包 括在-1与-2ppm之间由磷酸甘露糖二酯所产生的一个或更多个峰和/或在 4.5与5.5ppm之间由磷酸甘露糖单酯所产生的一个或更多个峰，所述测定 在27℃下，在pH为8的D₂O中进行，并使用甘油磷酰胆碱作为内标，其 中甘油磷酰胆碱的化学位移值取为0.43。

16.如权利要求15的甘露糖蛋白，其中在-1与-2ppm之间由磷酸甘露 糖二酯所产生的所述一个或更多个峰的面积与在4.5与5.5ppm之间由磷 酸甘露糖单酯所产生的所述一个或更多个峰的面积之比为至少90∶10。

17.包含权利要求14或15或16的甘露糖蛋白以及一种或更多种葡萄 酒添加剂的组合物。