[发明专利]合成头孢克洛的方法

说明书

本发明涉及合成头孢克洛(cefaclor)的方法，所述方法包括在存在酶的情况下用7-氨基-3-氯-头孢烷酸(7-ACCA)与活性形式的D-苯基甘氨酸反应，本发明涉及包含头孢克洛的水性混合物以及用于从该水性混合物中回收头孢克洛的方法。 

用于对头孢克洛进行酶促合成的方法可从多种来源已知。EP 567 323公开了一种方法，用于在0至20℃的温度以及环境pH下对头孢克洛进行酶促合成，其中采用了高的D-苯基甘氨酸甲酯与7-ACCA的摩尔比(5至6)，这导致了93％和88.2％的产率。活性侧链与β-内酰胺核的高摩尔比是人们不期望，因为这增加了成本以及酶促合成反应中形成的副产物(例如，D-苯基甘氨酸)，所述副产物难于与最终的抗生素(头孢克洛)分开。 

EP 730 035目的在于在用于合成头孢克洛的酶促工艺中降低D-苯基甘氨酸酰胺对7-ACCA的摩尔比。通过将青霉素G酰胺酶固定于吖内酯(azlactone)聚合物上，获得的相对7-ACCA的头孢克洛产率为98％和94％，其中，D-苯基甘氨酸酰胺与7-ACCA的摩尔比在2至3之间。 

我们发现，当活性形式的D-苯基甘氨酸与7-ACCA的摩尔比在大约2至3之间时，对头孢克洛的酶促合成反应期间形成的副产物的量仍然太大，这导致在从反应混合物回收头孢克洛期间的操作性问题，和/或无法获得实质上纯的形式的头孢克洛。 

本发明的目的是提供从7-ACCA和活性形式的D-苯基甘氨酸对头孢克洛进行酶促合成的方法，该方法没有上述缺点。 

这根据本发明通过用于对头孢克洛进行酶促合成的方法来获得，所述方法包括：在存在酶的情况下，用7-氨基-3-氯头孢烷酸(7-ACCA)与活性形式的D-苯基甘氨酸(PGa)在反应混合物中反应，形成头孢克洛，其中，7-ACCA和/或PGa在反应期间向反应混合物中加入。 

令人吃惊地，我们发现，在根据本发明的用于合成头孢克洛的方法中，相对7-ACCA而言产生的头孢克洛的量高于其中在反应开始即加入用于反应的全部量的7-ACCA和PGa的酶促合成方法所得到的。 

令人吃惊地，我们发现，在根据本发明的用于合成头孢克洛的方法中，头孢克洛的转化率可以高于90％，优选高于92％，优选高于95％，更优选高于96％。 

本文中使用的头孢克洛的转化率被定义为相对加入到反应混合物中的7-ACCA的总量(以摩尔表示)而言产生的头孢克洛的量(以摩尔表示)。 

头孢克洛的产率被定义为相对加入的7-ACCA的总量(以摩尔表示)从反应混合物中回收的头孢克洛的量(以摩尔表示)。 

此外，我们发现，在根据本发明的用于合成头孢克洛的方法中，形成非常少量的副产物。当副产物(例如D-苯基甘氨酸)的浓度在反应混和物中较低时，看起来可从反应混合物中回收实质上纯的形式的头孢克洛。头孢克洛的实质上纯的形式被定义为：包含至少94(w/w)％，优选至少95(w/w)％，优选至少96(w/w)％，优选至少97(w/w)％，优选至少98(w/w)％的头孢克洛，优选至少99(w/w)％的头孢克洛的产品。 

在根据本发明的用于合成头孢克洛的方法中，优选地，以低于2的PGa与7-ACCA的摩尔比将7-ACCA和PGa加入到反应混合物中，优选地，低于1.8，更优选地，低于1.5，最优选地，低于1.2。我们发现，当PGa与7-ACCA的摩尔比保持为低于这些值时，在合成反应期间几乎不形成副产物，在回收头孢克洛期间几乎遇不到操作性问题。 

本文中使用的PGa与7-ACCA的摩尔比被定义为以摩尔表示的加入到反应混合物中的PGa的总量除以以摩尔表示的加入到反应混合物中的7-ACCA的总量。 

在根据本发明的酶促合成头孢克洛的方法中，在反应期间向反应混合物中加入7-ACCA和/或PGa。优选地，在超过10分钟，优选超过20分钟，优选超过30分钟，优选超过60分钟，优选超过90分钟，优选小于360分钟，优选少于240分钟，优选少于120分钟的合成反应期间将待加入到反应混合物中的7-ACCA和/或PGa的总量中的至少一部分以连续或间断模式加入到反应混合物中。 

根据本发明的用于合成头孢克洛的方法优选是下述方法，其中，在合成反应期间向反应混合物中加入PGa。PGa可以以固体形式或在溶液中加入进反应混合物。