[发明专利]TRPC通道治疗心血管疾病的用途

说明书

本发明涉及TRPC通道、其失活突变体，或编码该TRPC通道或失活突变体的核苷酸序列用于制备治疗心血管疾病的药物的用途，以及筛选TRPC通道或其失活突变体调节剂的方法。

动脉粥样硬化是西方世界心血管疾病的主要原因之一。在2001年这些疾病在美国引起约一百万人死亡。此外，由于发展中国家生活方式的改变，动脉粥样硬化和相关的心血管疾病成为全世界的流行病。WHO报道到2010年心血管疾病将成为发展中国家的主要死亡原因。

因此，对预防和治疗动脉粥样硬化的新药物有巨大的医学需要。动脉粥样硬化的产生和发展是一个复杂并且没有完全理解的过程，其依赖于大量外遗传因子(例如生活方式、营养、锻炼)和遗传因子。大量临床观察显示动脉粥样硬化和动脉粥样化发生的病理生理学中涉及排列在血管内壁的内皮细胞的功能障碍(Ross，R.N.(1999)，Engl.J.Med.340：115-126)。

因此，涉及内皮功能调节的蛋白质可能是抗动脉粥样硬化疗法的主要靶标。由于重要的内皮功能如氧化氮(NO)的产生受胞内Ca²⁺水平的控制，因此Ca²⁺调节蛋白看来特别具有意义。

TRPC通道(一类新的铁通道蛋白)是表达于心血管和其他系统的Ca²⁺透过性非选择性阳离子通道。基于序列同源性，TRPC3、TRPC6和TRPC7组成了独特的TRPC亚家族。在表达系统中，这些通道通过G蛋白偶联受体或胞内Ca²⁺存储的消耗而激活(Clapham等人(2001)，Nat.Rev.Neurosci.2：387-396)。在培养的内皮细胞中TRPC3还促进氧化胁迫激活的阳离子流(Balzer等人(1999)Cardiovasc.Res.42：543-549)。

为了研究TRPC1在平滑肌细胞中的功能性作用，在WO 02/059155中使用了针对TRPC1特异性表位的抗体。然而，该表位并未在其他TRPC通道中发现。WO 05/049084公开了在分离的大鼠心室肌细胞中使用化合物2-氨基乙氧基硼酸二苯酯(2-APB)进行的功能研究。然而，已知该化合物尤其对TRPC3显示非特异性和可疑的效应(van Rossum等人(2000)，J.Biol.Chem.，275，28562-28568)。

根据本发明，我们使用遗传方法在动脉粥样硬化兔的内皮细胞中体内抑制了TPRC3、TRPC6和TRPC7的活性。令人吃惊地，我们在显性负TRPC3基因处理的血管中发现了血管功能的显著改善和动脉粥样硬化组织学标志的减少，这意味着抑制TRPC通道(特别是上述通道)的活性显示了抗动脉粥样硬化效应。这些发现在TRPC通道和心血管疾病如动脉粥样硬化之间建立了新的联系。

因此，本发明的一个主题涉及TRPC通道、其失活突变体，或者编码该TRPC通道或失活突变体的核苷酸序列用于制备治疗心血管疾病特别是动脉粥样硬化的药物的用途。

优选的TRPC通道为TRPC3通道、TRPC6通道或TRPC7通道，尤其是TRPC3通道或TRPC6通道，特别是TRPC3通道。

相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：1(TRPC3)、，SEQ ID NO：5(TRPC6)和SEQ ID NO：9(TRPC7)，特别是编码TRPC3通道的氨基酸序列SEQ ID NO：1。相应的核苷酸序列为SEQ ID NO：2(TRPC3)、SEQ IDNO：6(TRPC6)和SEQ ID NO：10(TRPC7)，特别是编码TRPC3通道的核苷酸序列SEQ ID NO：2。