[发明专利]具有串联转录单位的重组流感病毒载体

权利要求书

1.组合物，所述组合物包含：

a)至少一种质粒，所述质粒包含两种或更多种vRNA生产用转录盒，所述转录盒选自：一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PAcDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB1 cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB2 cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒HA cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NP cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NA cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒M cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；和/或一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NS cDNA的PolI启动子，所述cDNA连接至PolI转录终止序列；和

b)至少一种质粒，所述质粒包含一种或更多种mRNA生产用转录盒，所述转录盒选自：一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PA的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB1的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；一种转录盒，其含有效连接至流感病毒PB2的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列；和/或一种转录盒，其含有效连接至流感病毒NP的DNA编码区的PolII启动子，所述DNA编码区连接至PolII转录终止序列，其中所述组合物包含8种用于vRNA的转录盒，其中用所述组合物转染细胞产生至少1×10²TCID₅₀/mL的滴度。

2.权利要求1的组合物，所述组合物用于由少于8种质粒生产流感病毒。

3.权利要求1-2中任一项的组合物，其中一种质粒具有8种vRNA生产用转录盒。

4.权利要求3的组合物，其中一种质粒具有1种mRNA生产用转录盒，另一种质粒具有3种mRNA生产用转录盒。

5.权利要求3的组合物，所述组合物具有4种mRNA生产用转录盒。

6.权利要求1-2中任一项的组合物，其中一种质粒具有6种vRNA生产用转录盒，另一种质粒具有2种vRNA生产用转录盒。

7.权利要求6的组合物，其中一种质粒具有1种mRNA生产用转录盒，另一种质粒具有3种mRNA生产用转录盒。

8.权利要求6的组合物，所述组合物具有4种mRNA生产用质粒。

9.权利要求1-2中任一项的组合物，其中一种质粒具有1种mRNA生产用转录盒，另一种质粒具有3种mRNA生产用转录盒。

10.权利要求1的组合物，所述组合物具有4种mRNA生产用质粒。

11.权利要求1-10中任一项的组合物，所述组合物还包含一种转录盒，所述转录盒包含连接至5′流感病毒序列的启动子，所述5′流感病毒序列包含连接至目标DNA的5′流感病毒非编码序列，所述目标DNA连接至3′流感病毒序列，所述3′流感病毒序列包含连接至转录终止序列的3′流感病毒非编码序列。

12.权利要求11的组合物，其中所述含目标DNA的转录盒处于与vRNA生产用转录盒不同的质粒上。

13.权利要求11的组合物，其中所述含目标DNA的转录盒处于与mRNA生产用转录盒不同的质粒上。

14.权利要求11的组合物，其中所述含目标DNA的转录盒处于具有其中一种vRNA生产用转录盒的质粒上。

15.权利要求11的组合物，其中所述含目标DNA的转录盒处于具有其中一种mRNA生产用转录盒的质粒上。