[发明专利]使用肽中间片段合成肽T－20

权利要求书

1.制备肽中间片段用于合成具有序列Ac-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQID NO：1)的肽或其对应物的方法，该方法包括步骤：

(a)提供式Z-E-[SUP]的固相合成支持物树脂，其中[SUP]是支持物树脂，E是谷氨酸残基，并且Z是NH₂-末端保护基，并且其中Z-E以0.5或更小的装载系数在[SUP]上存在，

(b)偶联氨基酸至Z-E-[SUP]以提供Z-YTSLIHSLIEESQNQQE-[SUP]；

(c)处理Z-YTSLIHSLIEESQNQQE-[SUP]以提供Ac-YTSLIHSLIEESQNQQE-OH(SEQ ID NO：2)切割产物；和

(d)使用Ac-YTSLIHSLIEESQNQQE-OH(SEQ ID NO：2)以合成包含Ac-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQID NO：1)的全部或部分的肽。

2.权利要求1所述的方法，其中在步骤(a)中[SUP]包含三苯甲基。

3.权利要求2所述的方法，其中在步骤(a)中[SUP]包含氯-三苯甲基。

4.权利要求1至3所述的方法，其中Z是Fmoc基团。

5.权利要求1所述的方法，其中在步骤(a)中Z-E以小于0.5的装载系数在[SUP]上存在。

6.权利要求5所述的方法，其中在步骤(a)中Z-E以0.2至0.5之间的装载系数在[SUP]上存在。

7.权利要求1所述的方法，其中在步骤(b)中氨基酸以1至1.5当量之间的量偶联至Z-E-[SUP]。

8.权利要求1所述的方法，其中在步骤(d)中使Ac-YTSLIHSLIEESQNQQE-OH(SEQ ID NO：2)与具有序列H-KNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQ ID NO：4)的肽起反应以提供具有序列Ac-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQ ID NO：1)的肽。

9.权利要求8所述的方法，其中H-KNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQ ID NO：4)是通过使Z-KNEQELLELDKWASLWNW-OH(SEQ ID NO：3)肽与苯丙酰胺起反应而形成的。

10.制备肽中间片段用于合成具有序列Ac-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQID NO：1)的肽或其对应物的方法，该方法包括步骤：

(a)提供式Z-W-[SUP]的固相合成支持物树脂，其中[SUP]是支持物树脂，W是色氨酸残基，并且Z是NH₂-末端保护基，并且其中Z-W以0.5或更小的装载系数在[SUP]上存在，

(b)偶联氨基酸至Z-W-[SUP]以提供Z-KNEQELLELDKWASLWNW-[SUP]；

(c)处理Z-KNEQELLELDKWASLWNW-[SUP]以提供Z-KNEQELLELDKWASLWNW-OH(SEQ ID NO：3)切割产物；和

(d)使用Z-KNEQELLELDKWASLWNW-OH(SEQ ID NO：3)以合成包含Ac-YTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLELDKWASLWNWF(SEQID NO：1)的全部或部分的肽。

11.权利要求10所述的方法，其中在步骤(d)中使Z-KNEQELLELDKWASLWNW-OH(SEQ ID NO：3)与苯丙酰胺起反应以形成H-KNEQELLELDKWASLWNWF-NH₂(SEQ ID NO：4)。